急性毒性藻红外测试原理:藻类具有光合磷酸化和氧化磷酸化两套能量代谢系统,对毒物毒性响应的能量变化即红外辐射变化易被红外测温仪测试。急性毒性藻红外测试技术是利用对毒物毒性敏感的藻类(敏感藻)建立的藻类急性毒性测试方法。由于急性毒性藻红外测试中联合作用的评价方法是藻红外测试法的重要组成,其评价方法能否构建、怎样构建直接关系到藻红外测试技术的应用范围。为此,2007年至2009年开展了急性毒性藻红外测试中联合作用的评价方法的探索性实验。同期,为认知毒物对藻类的慢性毒性作用,进行了有机毒物对藻类生长的半抑制量测试实验。①联合作用实验1)结果:a.联合偏差系数法的构建根据联合作用类型的定义,根据实验表现出的敏感藻响应定量毒物的半剂量与倍剂量的半、倍温差效应(表1),确定并用联合作用系数θ来评价联合作用,θ>1为协同作用,θ=1为相加作用,θ<1为拮抗作用,独立作用可直接分析.θ计算式为:θ= T /(TA + TB + TC+…)式中:θ—混合毒物引起敏感藻响应温差的联合作用系数; T—混合毒物引起敏感藻产生的绝对平均最大温差; TA、TB、TC…—混合毒物中单一毒物引起敏感藻产生的绝对平均最大温差,其中各种毒物在混合毒物中的质量比为1/n(n为混合毒物中毒物种类数)。通过平均温差偏差系数算式求出9种平均温差偏差系数,再对其平均得到总平均温差偏差系数(简称总均偏差系数),f表示,用f值调整相加作用的θ理论值(θ=1)。平均温差偏差系数计算如下:平均温差偏差系数绝对值=(相加作用理论温差-平均实测温差)÷相加作用理论温差θi > 1+f,即θi>1.06协同作用1-f≤θi≤1+f,即0.94≤θi≤1.06相加作用θi < 1- f,即θi < 0.94拮抗作用Tф<Tβ<Tλ- f·Tλ独立作用(Tф:毒性效应最强药品产生的温差,Tβ-联合作用的温差,Tλ-相加作用的温差,f·Tλ-偏差温差。)b.联合偏差系数法的验证a)重金属的联合作用:用联合偏差系数法分析4种重金属6种混合对短线脆杆藻的联合作用为,3次拮抗作用(氯化钡+硝酸铅,硝酸铅+硫酸汞,硝酸铅+硫酸汞),2次独立作用(氯化钡+硫酸汞,硝酸铅+氯化铬),1次相加作用(氯化钡+氯化铬);b)有机毒物的联合作用:用联合偏差系数法分析4种有机药品6种混合对羊角月牙藻的联合作用为,2次协同作用(苯酚+磺胺,甲醛+聚丙烯酰胺),3次独立作用(苯酚+聚丙烯酰胺,甲醛+磺胺,磺胺+聚丙烯酰胺),1次拮抗作用(苯酚+甲醛);c)农药的联合作用:用联合偏差系数法分析8种农药12种混合对水华鱼腥藻、纤细裸藻的联合作用为,9次拮抗作用,3次独立作用.其中,对水华鱼腥藻引起联合作用的二元毒物是,盖草能+井岗霉素引起独立作用,其余5种二元毒物引起拮抗作用;对纤细裸藻引起联合作用的二元毒物是,草甘膦+杀虫单,百草枯+三唑酮引起独立作用,其余4种二元毒物引起拮抗作用;2)结论通过以上的二元联合作用试验,建立了联合偏差系数法,并对其可行性进行了有效地验证,最终建立了一套适用于藻红外辐射测试技术的联合作用分析评价方法;②慢性毒性实验1)结果苯及其同系物中苯、甲苯、二甲苯、氯苯、苯酚的半抑制量分别依次为1.5 g/L、0.6 g/L、0.5 g/L、0.6 g/L、0.45g/L;磺胺、聚丙烯酰胺、甲醛、三氯甲烷的半抑制量值依次为0.5 g/L、0.1 g/L、0.05 g/L、0.7 g/L;乙二醇对羊角月牙藻的生长干扰作用不明显,甚至在低浓度时表现为生长促进作用,其慢性毒性尚不确定。2)结论药品本身毒性越大,比如:苯酚、甲醛,对羊角月牙藻的慢性毒性越大,对其生长干扰也越大,相应的半抑制量值也越小。通过测定半抑制量研究对藻类慢性毒性效应的方法是可行的。