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卵巢癌是女性生殖系统三大恶性肿瘤之一,发病率约占5~7/10万。因为其起病隐匿,60~70%的病人表现为分期较晚,需要接受较大的手术、精细而频繁复杂的辅助化疗,5年生存率始终在30%左右。卵巢癌已经成为严重威胁女性生命和健康的主要肿瘤。而卵巢上皮性癌则在所有的妇科恶性肿瘤中具有较高的病死率,局部浸润和转移则是致病人死亡的主要原因。因此探索其浸润转移机制,寻找有价值的可以预测转移及指导临床治疗的生物学指标成了卵巢肿瘤研究的热点。1996年,Liston等运用Southern杂交和PCR技术在人胚胎脑组织中克隆出凋亡抑制蛋白(Inhibitor of apoptosis proteins,IAPs)家族的新基因。该基因定位于Xq25,故命名为X连锁的凋亡抑制蛋白(X-linked inhibitor of apoptosis protein,XIAP)基因。作为IAPs的一名新成员,XIAP基因的凋亡抑制作用在多种肿瘤组织中已经得到证实。大量研究表明,XIAP的过表达参与肿瘤的进展,与肿瘤的预后密切相关。本文旨在探讨:1、XIAP基因在人卵巢上皮性癌组织中的表达特点及其表达水平的变化与卵巢上皮性癌临床、病理等因素的关系。通过统计分析,筛选出与卵巢上皮性癌转移相关的危险因素,从而为临床治疗、随诊以及预后判断提供理论依据。2、通过观察化疗药物紫杉醇、顺铂作用后卵巢上皮性癌细胞株3AO、SKOV3中XIAP基因表达的变化,为临床卵巢上皮性癌侵袭转移的治疗和进一步的实验研究奠定理论基础。第一部分XIAP基因在卵巢上皮性癌组织中的表达及其与临床病理因素的关系目的:通过对不同年龄、临床分期、组织学分级、病理类型、淋巴结(或远处)转移以及有无癌性腹水(或腹腔冲洗液)的卵巢上皮性癌组织中XIAP基因表达进行研究,探讨XIAP基因表达与其临床病理各相关因素的相关性。方法:采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测50例卵巢上皮性癌标本及12例正常卵巢标本的卵巢组织中XIAP mRNA的表达,半定量分析电泳结果。卵巢上皮性癌与正常卵巢组织中XIAP基因表达的关系采用x~2检验和Fisher’s精确概率检验进行统计学分析。XIAP基因表达水平与卵巢上皮性癌的临床病理因素之间的关系采用单因素方差分析进行统计学分析。结果:1、在12例正常卵巢组织标本中XIAP阳性表达率为13.3%,50例卵巢上皮性癌标本中XIAP阳性表达率为74%,二者差异有显著性(P<0.01)。2、不同临床分期的肿瘤组织中XIAP基因表达阳性率之间的差异有显著性,具有统计学意义(P<0.05)。3、腹水或腹腔冲洗液查见癌细胞者XIAP的表达几乎全为阳性,表达强度明显高于腹水或腹腔冲洗液者未查见癌细胞者,分期晚者表达更强,统计学意义显著(P<0.01)。4、高分化与低分化卵巢癌组织的XIAP基因表达无明显差异(P>0.05)。结论:1、卵巢上皮性癌组织中XIAP mRNA的表达强于正常卵巢组织。2、XIAP的高表达与卵巢癌的临床分期呈正相关,与癌性腹水形成有明显的相关性。3、检测XIAP表达水平对早期诊断卵巢癌及判断卵巢癌的临床进展有一定的参考价值。第二部分紫杉醇、顺铂对卵巢癌细胞株SKOV3、3AO中XIAP基因表达的影响目的:探讨XIAP基因在卵巢癌细胞株SKOV3及3AO中的表达。研究紫杉醇、顺铂及二者联合作用对人卵巢上皮性癌细胞株SKOV3及3AO的生长抑制作用,及其对SKOV3及3AO细胞株中XIAP基因表达的影响,并初步探讨其作用机制。方法:倒置显微镜下观察SKOV3、3AO细胞在不同浓度的各组化疗药物作用下形态学的变化;采用RT-PCR和免疫组化SABC法检测SKOV3、3AO细胞中XIAP mRNA和蛋白的表达,及一定浓度梯度的化疗药物(顺铂、紫杉醇、顺铂+紫杉醇)作用后细胞内XIAP表达的变化,MTT法测定药物作用后细胞的存活率,并分析XIAP的表达与细胞生存率的关系。结果:1、XIAP mRNA和蛋白在SKOV3细胞中的表达高于3AO细胞,同浓度同种药物作用下SKOV3细胞存活率及XIAP蛋白表达高于3AO(P<0.05),1μg/ml顺铂对细胞几乎无影响,同浓度紫杉醇作用强于顺铂(P<0.05),紫杉醇与顺铂联用作用强于两种药物单用(P<0.05);随药物浓度增高细胞XIAPmRNA及蛋白表达逐渐减少,细胞存活率逐渐降低,XIAP的表达与细胞存活率有线性回归及相关关系(P<0.05)。2、MTT检测结果显示紫杉醇、顺铂对SKOV3/3AO细胞的生长抑制作用呈明显的剂量依赖关系,而联合用药对SKOV3/3AO细胞的生长抑制作用较单独作用显著。结论:1、紫杉醇、顺铂联合作用可增加对卵巢上皮性癌SKOV3/3AO细胞的生长抑制率,为临床卵巢上皮性癌的联合化疗提供理论依据。2、紫杉醇、顺铂均能下调卵巢上皮性癌细胞株中XIAP的表达,提示二者将可能为临床上抑制肿瘤转移的药物治疗带来希望,并为进一步体内研究提供有利的实验依据。3、XIAP的表达可能与细胞在应激条件下的抗凋亡能力呈正相关。