目的：通过对KM原料药的性状、鉴别、检查和含量测定方法的研究,为该药物的质量控制建立一套合理的分析方法,继而为稳定性试验研究奠定实验基础和条件,为制定准确可靠的质量标准提供依据和支撑。方法：依据《中国药典》2010年版凡例和附录相关内容,采用HPLC、 GC等方法对该药物的性状(外观、臭,溶解度,熔点,比旋度)、鉴别(红外鉴别、高效液相色谱法保留时间鉴别)、检查(水分、氯化物、硫酸盐、酸度、炽灼残渣、重金属、砷盐、有关物质和残留溶剂等项目)以及含量测定方法进行了研究；稳定性试验(影响因素试验、长期试验、加速试验)中,针对该药物的性状、酸度、比旋度、对映异构体、有关物质和含量等指标进行了研究,考察各指标的变化。在含量测定中,确定的高效液相色谱法的色谱条件Ⅰ为：色谱柱：Symmetrix ODS-RC18 (4.6×250 mm,5μm);流动相：乙腈-水(6：94,v/v)；检测波长：254 nm；流速：1.0 mL/min;柱温：35℃；进样量：10 gL。在有关物质检测中,采用]HPLC色谱系统Ⅱ：色谱柱：SymmetrixODS-AQ C18(4.6x250 mm,5μm),检测波长：254 nm,流速：1.0 mL/min,柱温：35℃,流动相B：乙腈,流动相A：乙腈-水(3：97,v/v),进样量：10μL；梯度洗脱。本品的对映异构体作为特殊杂质,则采用色谱系统Ⅲ：色谱柱：Daicel CHIRALPAK AD手性柱(4.6x250 mm,10μm),柱温：40℃,流动相：正己烷-无水乙醇(53：47,v/v),流速：1.3 mL/min,检测波长：254 nm,进样量：10μL。对本品中的残留溶剂苯甲醇和氯苄的测定采用GC法的色谱系统Ⅰ：色谱柱：HP-5 (30 mx0.32 mmx0.25μm),载气流速(氮气)：1.0mL/min,柱温：115℃保持6 min,检测器温度：300℃,进样口温度：260℃,分流比：3：1,进样方式：手动进样。本品中甲醇、四氢呋喃、乙酸乙酯和二氯甲烷四种残留溶剂的测定,则采用GC法色谱系统Ⅱ：色谱柱：DB-624(30mx0.32mmx0.18μm),载气流速(氮气)：l.OmL/min,柱温：60℃保持10min,然后以每分钟30℃的速度升至220℃,保持5分钟。检测器温度：250℃,进样口温度：200℃,分流比：5：1,进样方式：自动顶空,顶空条件：平衡温度为80℃,平衡时间30 min,传输管温度为130℃,加压时间为6s,进样体积为1.0mL。结果：1、本品为白色结晶性粉末,无臭；在二甲基甲酰胺(DMF)、0.1mol/L盐酸或0.1mol/L氢氧化钠中略溶,在乙醇或甲醇中微溶,在水中极微溶解,在乙腈中不溶。本品在248℃左右时开始融化,但是熔点较高,熔距较长,并且270℃尚未完全熔融,与热分析结果一致；在25℃时比旋度为+25°-+29°。2、红外光谱和高效液相色谱法鉴别都显示：多批样品与对照品鉴别结果均一致。3.含量测定比较了两种测定方法(高相液相色谱法和电位滴定法)的测试结果,综合考虑成本、操作可行性和简便性等因素,最终选用了高效液相色谱法来测定本品的含量。建立的色谱系统Ⅰ为：Symmetrix ODS-R C18 (4.6×250mm,5μm)色谱柱,流动相为乙腈-水(6：94),检测波长为254nm,流速为1.0mL/min,柱温为35℃,进样量为10μL。4、本品多批样品的水分含量均在5.9%-6.5%之间；氯化物残留量均小于0.02%；硫酸盐的残留量均小于0.04%；pH值在6.2-6.3之间；炽灼残渣均不大于0.1%；重金属均小于20ppm；砷盐检查均无砷斑出现,而且1ppm的标准砷斑明显。另外,对有关物质、光学异构体及残留溶剂进行了研究,由于无法在同一色谱条件下完成所有杂质的分离测定,因此采用了多个色谱系统进行检查,方法学验证均符合要求。有关物质测定：已知杂质(非对映异构体)均未检出,单个最大杂质均不大于0.1%,总杂质不大于0.3%；对映异构体均未检出；残留溶剂测定：苯甲醇、氯化苄、乙酸乙酯、二氯甲烷、四氢呋喃均未检出,甲醇有三批样品中检出,但残留量均小于0.002%,符合ICH和《中国药典》2010年版的规定。5.影响因素试验、加速试验和长期试验主要考察了性状、酸度、水分、比旋度、对映异构体、有关物质和含量测定等项目。影响因素试验比较了0天、5天和10天,加速试验考察了0、1、2、3和6月,长期试验考察了0、3和6月,所有指标均无明显变化,质量基本稳定。结论：本文所建立的各种分析方法均符合《中国药典》2010年版和ICH的规定,各种分析方法和检测结果可以作为该药质量标准制定的技术后盾和数据支撑,同时,为推动KM及类似药物质量控制方法的发展,丰富了研究思路和方向。