论文部分内容阅读
目的:成功建立热性哮喘小鼠模型;从哮喘的免疫机制角度出发,采用分子生物学和分子免疫学研究方法,观察麻杏陷胸颗粒对热性哮喘小鼠血清IL-12和IL-13水平的影响,发现其可能的作用靶点;并从病理学角度观察哮喘小鼠肺组织的病理变化及各干预组药物对其的影响,从而证实麻杏陷胸颗粒的有效性,为其治疗小儿哮喘提供实验理论依据。方法:健康、雄性KM小鼠80只,SPF级,鼠龄3-4周,体重(30±4)g。采用EXCEL随机分组的方法分为5组:空白组(A组)、模型组(B组)、麻杏陷胸颗粒组(C组)、地塞米松组(D组)、麻杏陷胸颗粒+地塞米松组(E组),每组16只。建立热性哮喘模型:在实验的第1天至第14天为BCDE组小鼠每天喂服1g/ml党参、黄芪水煎剂,0.57ml/d/20g,2周后成功造出小鼠实热证模型;于实验第1、7、14天以卵蛋白液致敏小鼠,再以卵蛋白溶液雾化激发小鼠,诱喘成功后小鼠表现为:前期烦躁不安,活动频繁,头面部瘙痒,后期萎靡不振,安静少动,毛发竖立,呼吸加深加快,甚者伸颈,缩胸,收腹呈喘息状,二便失禁等。药物干预实验:麻杏陷胸颗粒组:自激发第1天起,每天灌服麻杏陷胸颗粒溶液,按正常人体剂量9.1倍进行换算,每天1次,每次灌服0.36ml/20g,连续1周;地塞米松组:自激发的第1天起,腹腔注射地塞米松3mg/kg/d,连续1周;麻杏陷胸颗粒+地塞米松组:自激发第1天起,每天灌服麻杏陷胸颗粒溶液,每天1次,每次灌服0.36ml/20g,同时腹腔注射地塞米松3mg/kg/d,连续1周。末次激发的12小时内,首先眼球取血,离心获取血清标本,之后解剖肺组织。测定各组热哮小鼠血清IL-12、IL-13含量,制备肺组织病理学涂片,观察小鼠肺组织炎性渗出及支气管病理变化的情况。结果:与空白组比较,模型组小鼠血清IL-12含量明显下降,两组间差异有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,麻杏陷胸颗粒组IL-12水平升高,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,地塞米松组IL-12水平升高,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,麻杏陷胸颗粒+地塞米松组IL-12水平升高,两组间差异有统计学意义(P<0.05);与麻杏陷胸颗粒组比较,麻杏陷胸颗粒+地塞米松组IL-12水平升高,两组间差异有统计学意义(P<0.05);与地塞米松组比较,麻杏陷胸颗粒+地塞米松组IL-12水平升高,两组间差异有统计学意义(P<0.05);麻杏陷胸颗粒组与地塞米松组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。以上提示热性哮喘发作期小鼠血清IL-12降低;麻杏陷胸颗粒和地塞米松均可升高血清IL-12水平;麻杏陷胸颗粒和地塞米松合用可增强升高血清IL-12水平的能力;地塞米松、麻杏陷胸颗粒在升高小鼠血清IL-12水平上无显著差异,两者疗效相当。血清IL-13含量变化与上述相反。肺组织病理片显示:各组HE染色的肺组织病理片在光镜下观察可见:空白组支气管粘膜光滑、完整,肺内结构清晰,肺泡腔未见炎性细胞及炎性渗出物;模型组支气管腔及肺组织内可见较多的炎性渗出物,周围有炎症细胞浸润,管腔壁上皮细胞坏死脱落,伴杯状细胞大量增生,肺血管充血、甚至水肿,部分支气管纤毛则有脱落,具体表现为粘连、倒伏、坏死等形式;各药物组肺部炎性浸润、充血均较模型组减轻,其中麻杏陷胸颗粒+地塞米松组减轻最为明显。结论:采用党参、黄芪水煎剂及卵蛋白可成功制备热性哮喘小鼠模型;麻杏陷胸颗粒可以上调IL-12水平,下调IL-13水平,它可能是通过调整紊乱的Th1/Th2平衡来发挥治疗作用的;为麻杏陷胸颗粒治疗小儿哮喘提供了一定的实验理论依据。