草甘膦胁迫对异色瓢虫共生菌的影响

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长期以来,除草剂草甘膦普遍被认为对动物是无毒的,因为草甘膦只会干扰植物和微生物中一种用于产生若干关键氨基酸的重要酶。但是,近年来的研究表明草甘膦对昆虫的生存会产生消极的影响,尤其是草甘膦能够通过干扰昆虫的微生物群落多样性或其组成结构,从而对宿主昆虫的生长发育产生影响。转基因作物推广商业化种植促使了除草剂草甘膦用量的不断攀升,占据了全球除草剂市场的一半。为了明确草甘膦对田间非靶标生物的安全性,本研究以捕食性天敌异色瓢虫为研究对象,以昆虫共生菌为切入点,利用高通量测序以及分子生物学技术系统研究了草甘膦对异色瓢虫幼虫和成虫共生菌群落组成和结构的影响。主要研究结果如下:1.异色瓢虫不同发育阶段共生菌的多样性及其群落组成首先,为了明确异色瓢虫的共生菌群落组成和结构,测定和分析了异色瓢虫整个发育阶段的细菌群落组成结构。结果表明,所有发育阶段微生物的共生菌群落总共注释到36个门、81个纲、212个目,410个科、900个属。不同发育阶段的细菌群落的多样性及丰富度不同,其中,二龄幼虫的共生菌群落的多样性最低,而卵期和成虫期的细菌群落的多样性较高。在门水平上,异色瓢虫的优势菌为厚壁菌门(Firmicutes)、变形菌门(Proteobacteria)、放线菌门(Actinobacteria)等。在属水平上,优势菌属主要包括葡萄球菌属(Staphylococcus)、肠杆菌属(Enterobacter)、谷氨酸杆菌(Glutamicibacter)、不动杆菌属(Acinetobacter)、棒杆菌属(Corynebacterium_1)。研究结果明确了异色瓢虫的细菌群落多样性及其组成,为进一步研究草甘膦对异色瓢虫体内共生菌的影响奠定了基础。2.草甘膦胁迫对异色瓢虫幼虫共生菌的影响通过16S扩增子测序技术,对3个草甘膦浓度胁迫下的异色瓢虫幼虫体内共生菌进行多样性和组成分析,与对照相比较,发现草甘膦胁迫下的异色瓢虫幼虫共生菌的多样性及丰富度并无显著的差异。在门水平上,其优势菌是相同的,分别是厚壁菌门(Firmicutes)、变形菌门(Proteobacteria);同时在属水平上的优势菌属也是相同的,分别是葡萄球菌属(Staphylococcus)、肠杆菌属(Enterobacter)、不动杆菌属(Acinetobacter)、肠球菌属(Enterococcus)。但是,它们的优势菌属的丰度是不同的,5 mg/L、10 mg/L草甘膦促使葡萄球菌属(Staphylococcus)的含量降低,肠杆菌属(Enterobacter)的含量升高。而20 mg/L草甘膦对优势菌属的丰度无显著的影响。从生长发育指标来看,与对照相比,20 mg/L草甘膦浓度处理下异色瓢虫的存活率没有显著性的差异(P>0.05),但是草甘膦胁迫会显著影响异色瓢虫的体重。3.草甘膦胁迫对异色瓢虫成虫共生菌的影响以异色瓢虫成虫为研究对象,结果发现草甘膦胁迫对异色瓢虫的繁殖无显著性的影响。通过16S扩增子技术测序发现,与对照相比,草甘膦胁迫对异色瓢虫成虫体内共生菌的群落结构无显著的影响。在门分类水平,主要是变形菌门(Proteobacteria)和厚壁菌门(Firmicutes);在属水平上,其势菌属包括沙雷氏菌属(Serratia)、乳球菌属(Lactococcus)、肠杆菌属(Enterobacter)、葡萄球菌属(Staphylococcus)以及哈夫尼菌属-肥杆菌属(Hafnia-Obesumbacterium)。同时,结果也证明了草甘膦胁迫对异色瓢虫成虫优势菌属的丰度无显著的影响。
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