论文部分内容阅读
目的:通过与单一组分的效应比较和量效关系分析,观察验证由虫草多糖、绞股蓝总皂甙、苦杏仁甙组成的中药组分复方(CJK)的抗肝纤维化效应及其配伍优势。
方法:运用经典的二甲基亚硝胺(DMN)腹腔注射诱导大鼠肝纤维化模型(DMN10μg·kg-1,每周连续3d,连续4w,共12次),先后分两批实验进行。首批实验采用Wistar雄性大鼠90只,随机取6只作为正常组,其余大鼠在4周造模结束后再随机分为模型组、虫草多糖组(C,剂量为60mg/kg)、绞股蓝总皂甙组(J,200mg/kg)、苦杏仁甙组(K,80mg/kg)、CJK方组(含C、J、K分别为60、50、80mg/kg)、扶正化瘀方组、秋水仙碱组。予相应药物灌胃给药治疗3周。正常组和模型组灌以等量的饮用水。观察:(1)肝、脾、体重变化;(2)肝组织病理变化(HE染色与胶原染色);(3)肝组织羟脯氨酸(Hyp)含量变化(水解法);(4)血清ALT、AST、Alb、GGT等肝功能指标的变化;(5)肝组织超氧化物歧化酶(SOD)活性、过氧化产物丙二醛(MDA)含量、谷胱甘肽(GSH)含量、谷胱甘肽过氧化物(GSH-PX)活性等过氧化损伤指标的变化。第二批实验采用Wistar大鼠60只,随机取5只作为正常组,其余大鼠在4周造模结束后再随机分为模型组、CJK组、CJK半量组、扶正化瘀方组。用药方法和疗程同前。观察项目:(1)肝、脾、体重变化;(2)肝组织病理变化(HE染色与胶原染色);(3)肝组织羟脯氨酸(Hyp)含量变化;(4)血清ALT、AST、Alb、GGT等肝功能指标的变化;(5)肝组织超氧化物歧化酶(SOD)活性、过氧化产物丙二醛(MDA)含量变化(6) a-SMA蛋白的表达(免疫组化SABC法)。
结果:首批实验显示:(1)较之正常组,模型大鼠肝脏有明显胶原沉积与肝纤维化,伴有不同程度的肝细胞炎性损伤坏死,肝组织Hyp含量显著升高。同时,血清GGT、ALT活性与AST活性均显著升高、Alb含量显著下降;肝组织GSH含量及SOD、GSH-Px活性显著降低,而肝组织MDA含量显著升高:(2)较之模型组,CJK复方组大鼠肝组织炎症与胶原沉积等病理变化减轻,肝组织Hyp、MDA含量及血清GGT、ALT、AST活性显著降低,而血清Alb含量、肝组织GSH含量及SOD、GSH-Px活性显著升高。且CJK复方与扶正化瘀胶囊疗效相当,无统计学差异,并优于秋水仙碱。(3)各单一组分组均可显著降低肝组织Hyp含量,但效应强度不及CJK复方(均为P<0.05)。同时,绞股蓝总皂甙对血清肝功能各项指标均具有显著改善作用,并能显著升高肝组织SOD、GSH-PX活性及显著降低肝组织MDA含量:虫草多糖可显著降低血清AST及肝组织GSH含量和升高血清Alb含量及肝组织GSH-PX活性;而苦杏仁甙显著降低血清ALT、AST活性,但无显著抗氧化作用。量效实验结果显示:(1)模型组肝组织羟脯氨酸含量均值达正常组的3倍,肝组织纤维化显著,伴a-SMA蛋白显著表达;血清GGT、ALT、AST活性及肝组织MDA显著升高,血清Alb、肝组织SOD活性显著降低。(2) CJK组结果与首批实验相近,肝Hyp含量、血清GGT、ALT、AST活性及肝组织MDA含量均显著低于模型组,并可提高血清Alb含量及肝组织SOD活性,同时可抑制肝组织a-SMA蛋白的表达。CJK组总体效应与扶正化瘀胶囊组相当。但CJK半量组的上述效应明显减弱,体现出显著的量效关系。
结论:
1.中药组分复方CJK有显著的抗肝纤维化和抗肝损伤作用。其效应强度优于方中的具有抗肝纤维化效应的单一组分以及秋水仙碱,而与原扶正化瘀方相当。
2.由虫草多糖、绞股蓝总皂甙、苦杏仁甙(以6/5/8配比)组成的抗肝纤维化中药组分复方CJK有显著的配伍增效优势,并存在显著剂量依赖关系。
3.中药组分复方aK抗肝纤维化的作用机理与抗脂质过氧化及抑制肝星状细胞活化有关。在抗氧化药理环节中,绞股蓝总皂甙是关键因素。