论文部分内容阅读
分心木（Diaphragma juglandis Fructus）是胡桃科植物核桃果核的干燥片状木质隔膜,其资源分布广泛,为我国的传统民间用药。分心木中所含化学成分主要有黄酮类、强心苷类、生物碱类和多糖等。分心木具有固肾涩精的传统功效,临床上用于治疗肾病,此外,其粗提物还具有抑菌和抗氧化的生物活性。文献中主要对分心木小分子化合物成分进行研究,对分心木多糖的研究相对较少,多糖是一类重要的活性成分,对其系统研究和开发利用的价值较大,目前已成为天然产物研究的一个新热点。目的:从分心木中提取、分离纯化多糖,并初步探究分心木多糖的活性;对分心木小分子成分进行系统分离纯化、鉴定,并对获得的单体化合物进行活性考察。方法:采用热水浸提-乙醇沉淀-Sevag液除蛋白的步骤提取分心木粗多糖,采用DEAE Sephadex A-25离子交换柱色谱和Sephadex G-75凝胶柱色谱分离纯化分心木多糖。在此基础上,通过红外吸收光谱（IR）、紫外吸收光谱（UV）、比旋光度、高效液相色谱（HPLC）、凝胶渗透色谱（GPC）等方法对多糖组分进行结构表征,并对其α-葡萄糖苷酶抑制活性和体外对糖基化终产物（AGEs）形成的抑制作用进行研究;采用普通硅胶柱色谱,Sephadex LH-20凝胶柱色谱,ODS柱色谱,制备薄层,重结晶以及制备HPLC等手段对分心木小分子成分进行分离纯化,根据理化性质并结合MS、NMR、UV和IR等技术对所得到的单体化合物进行了结构鉴定。对于分离到的部分单体化合物,采用Cu2+还原能力、抗亚油酸氧化能力、清除超氧阴离子活性、H2O2清除活性进行抗氧化活性研究,采用贴片法测定抑菌圈和二倍稀释法测定最小抑菌浓度进行抗菌活性研究。结果:获得两个新的、组分均一的多糖P4a和P5a,其相对分子质量分别为:7015 Da和13057 Da,单糖组成及摩尔比分别为:P4a（甘露糖︰鼠李糖︰葡萄糖︰半乳糖︰木糖︰阿拉伯糖︰岩藻糖=1︰23.1︰11.4︰72.2︰19.9︰25.7︰2.6）,P5a（甘露糖︰鼠李糖︰葡萄糖︰半乳糖︰木糖︰阿拉伯糖︰岩藻糖=1︰36.2︰26.7︰82.7︰12.3︰21.9︰2.5）。药理研究结果表明所获得的两个多糖组分对α-葡萄糖苷酶抑制作用IC50分别为192.1、55.7μg/mL,对AGEs形成抑制IC50分别为117.5、85.58μg/mL。从分心木中分离得到了13个单体化合物,分别经结构鉴定为:β-谷甾醇（1）、胡萝卜苷（2）、槲皮苷（3）、没食子酸（4）、taxifolin-3-O-?-L-arabinofuranoside（5）、原儿茶酸（6）、槲皮素（7）、二氢槲皮素（8）、没食子酸乙酯（9）、核桃素D（10）、槲皮素-3-O-（6″-没食子酰基）-β-D-半乳糖苷（11）、4,5,8-trihydroxy-?-tetralone-5-O-β-D-glucopyranoside（12）、4,5-dihydroxy-?-tetralone-4-O-β-D-glucopyranoside（13）,药理活性研究发现大部分单体化合物均具有良好的抑菌和抗氧化活性。结论:分心木多糖成分对α-葡萄糖苷酶和AGEs显示出良好的抑制活性,其在治疗糖尿病及心血管疾病方面有很好的潜力;分离得到13个化合物,其中化合物12、13为首次从分心木中分离得到,大部分化合物抗菌和抗氧化活性较好,为天然防腐剂的开发提供物质基础。