猪胎盘功能性肽的分离纯化及其活性的初步研究

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胎盘肽是人类功能性食品研究和开发的重要资源,猪胎盘是未被充分开发利用的资源,它含有人体所必需的多种氨基酸,像缬氨酸、亮氨酸、赖氨酸等,它还具有调节内分泌、增强免疫、补血美容、增强记忆、抗应激等功效。充分探索其生物活性功能,开发具有特殊生物活性,如抗氧化性、降血压性等的功能性食品或生物制品,具有重要的理论和实践意义。本文以猪胎盘作为原料,采用胃蛋白酶水解制备猪胎盘功能性短肽,研究其生物活性,旨在为猪胎盘功能性肽的充分利用提供科学依据。主要研究结果如下:(1)采用正交试验,在单因素试验的基础上,得到最佳工艺酶为胃蛋白酶,最佳工艺条件为酶与底物比13%、pH2.5、温度30℃,在最佳工艺条件下制得的猪胎盘酶解液粗提物的还原力为1.3257,水解度为41.38%。(2)利用紫外可见分光光度计,测得猪胎盘酶解液的胎盘肽含量为17.37mg/mL;紫外扫描猪胎盘酶解液,得到其最大吸收峰为205nm。(3)采用SDS-PAGE验证不同分子量酶解液的正确性,对不同分子量的猪胎盘酶解液的DPPH自由基清除活性这一主要指标的测定,得知<3KD的猪胎盘酶解液的活性最好,其DPPH自由基清除活性的IC50值为9.97mg/mL。将其经过SephadexG-25和Sephadex G-10的分离纯化,得到了活性较高的峰B组分,其DPPH自由基清除活性和ACE抑制活性的IC50值分别为7.89mg/mL和12.69mg/mL。(4)以DPPH作为主要指标,对分离纯化后的猪胎盘酶解液经高温、低温、酸和碱处理,得到处理后的酶解液的DPPH自由基清除活性的IC50值分别为9.89mg/mL、9.5mg/mL、8.94mg/mL、9.63mg/mL,与未处理的猪胎盘酶解液的IC50值7.89mg/mL相比,经过高温、低温和酸碱处理后的猪胎盘酶解液的DPPH自由基清除活性均有小幅度降低,但变化幅度不大,说明酶解得到的猪胎盘肽的稳定性较好。
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