论文部分内容阅读
[目的]研究表皮葡萄球菌agrC特异结合多肽对聚氯乙烯材料表面细菌生物膜形成的作用,为合成agrC为靶点治疗表皮葡萄球菌生物膜形成相关感染的特异性药物奠定基础。[方法]1.采用微量板半定量法确定agrC特异结合多肽的最佳抑菌浓度;2.采用微量板半定量法观察agrC特异结合多肽对表皮葡萄球菌不同生长时期生物膜形成能力的影响;3.利用扫描电镜观察PVC材料表面细菌生物膜的表面结构;4.利用激光共聚焦显微镜观察PVC材料表面细菌群落数量、细菌生物膜形成的厚度和细菌生物膜的三维结构。[结果]1.微量板半定量法结果显示表皮葡萄球菌agrC特异结合多肽的最佳抑菌浓度为 800μg/ml;2.微量板半定量法结果显示当agrC特异结合多肽浓度为800 μg/ml时,其在12h时对细菌生物膜的形成有明显抑制作用;3.扫描电镜观察显示表皮葡萄球菌ATCC35984在培养6h时,实验组与对照组均可见散在小的细菌团块;在培养12h时,实验组细菌团块明显少于对照组;在18h时两组均可见细菌团块相互连接成片状、塔状结构;在24h时两组均可见成熟生物膜结构,结构中可见大量无定形细胞外基质填充;在30h时,两组可见生物膜结构,但有部分呈分解状。表皮葡萄球菌ATCC12228在培养6、12、18、24和30h时,实验组和对照组细菌均未见生物膜形成。 ,4.激光共聚焦显微镜观察显示,实验组加入agrC特异结合多肽与对照组加入无关肽,培养12h时观察实验组PVC材料表面细菌明显少于对照组,且以死菌居多;而在6、18、24h两组细菌量未见明显差别,均以活菌居多。培养12h时观察实验组细菌生物膜厚度明显少于对照组,其余时间点生物膜厚度未见明显差别。[结论]1.表皮葡萄球菌与agrC特异结合多肽的抑菌强度之间存在剂量效应关系;2. agrC特异结合多肽在生物膜形成的聚集阶段对表皮葡萄球菌生物膜的形成有明显抑制作用:agrC特异结合多肽能抑制表皮葡萄球菌生物膜的形成能力;agrC特异结合多肽可以阻碍表皮葡萄球菌进一步聚集,使细菌团块疏松,抑制生物膜的形成;agrC特异结合多肽可以在细菌生物膜形成的聚集阶段抑制细菌增殖,加速细菌死亡,影响细菌生物膜形成的厚度。3. agrC特异结合多肽可以为治疗表皮葡萄球菌生物膜形成相关感染的特异性药物奠定基础,它作为预防用药可能更为有效,对成熟生物膜的抑制作用不明显。