论文部分内容阅读
本试验将四种除草剂加入到苋链格孢菌的培养基中，以期待改变苋链格孢菌的代谢过程从而产生新的活性除草化合物。试验结果表明加入苯达松(Bentazone)的苋链格孢菌的发酵液对反枝苋的除草效果比单纯将苋链格孢发酵液与苯达松混合的除草效果好。推测在此过程中产生了新的具有除草活性的化合物。为确定其成分，本研究采用色谱柱层析和薄层层析技术分离和纯化除草活性化合物、利用气质联用技术分析除草活性组分的化学组分，并对活性成分的除草活性进行了测定。为提高活性成分的发酵产率，本研究对发酵培养基进行优化。结论如下：1．将氟磺胺草醚(Fomesafen)加入培养苋链格孢菌的液体培养基后产生的发酵液对于反枝苋的除草效果与苋链格孢菌发酵液与氟磺胺草醚单纯混合的除草效果无明显差异；将精吡氟禾草灵(Fluazifop-P)及精喹禾灵(Quizalofop-p-ethyl)加入培养苋链格孢菌的液体培养基中产生的发酵液对于稗草的除草效果与苋链格孢菌发酵液与两种农药混合的除草效果也无明显差异；将苯达松加入培养苋链格孢菌的液体培养基后产生的发酵液的除草效果显著高于单纯将苋链格孢菌发酵液与苯达松混合的除草效果。2．研究结果表明，传统的PSK培养基并不利于其发酵。采用改良后的PSK培养基可显著提高发酵速度，并且也可显著提高发酵液的除草活性。因此，确定发酵培养基为不含葡萄糖的马铃薯匀浆PSK培养基。发酵过程中的温度为25℃，pH为6，溶氧保证充分，转速为150rpm，培养7d。3．除草活性化合物在经过柱层析分离过后发现用石油醚：乙酸乙酯=1:5的洗脱组分对反枝苋的抑制效果最高。因此，利用薄层层析的方法将此洗脱组分进行分离提纯，最后分离出9个组分。试验结果表明，6号和7号条带组分对反枝苋的种子萌发和胚根生长有较强的抑制作用，能引起叶片产生较大的坏死斑。6和7号活性明显高于原药苯达松。4．气相色谱与质谱联机技术对洗脱E组分进行了分析。最后检测的结果显示用石油醚：乙酸乙酯=1:5洗脱剂洗脱出来的组分大约有15种，其中有一种是跟原纯农药一致的C10H12N2O3S即苯达松。6号组分分子式确定为为C10H14N2O；7号组分由于被Si污染所以未能检测出其真正的化学式及结构式。因此，还需要对7号组分进行重新分离以得到新晶体并进行测定。