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小麦赤霉病是影响我国南方麦区、东北春麦区以及黄淮流域麦区的重要病害,可由多种镰刀菌引起,但主要致病种是禾谷镰刀菌Fusarium graminearum,通称为赤霉菌。赤霉菌引起小麦的穗腐,不仅使小麦籽粒产量降低、品质变劣,而且病麦粒中存留有病菌产生的真菌毒素,如脱氧雪腐镰刀菌烯醇(Deoxynivalenol,DON)和玉米赤霉烯酮(Zearalenone,ZEN),食用污染毒素的病麦及其制成品后会引起人畜中毒,还有致癌、致畸和诱变的作用。但是我国相关的研究比较少,特别是检测水平偏低。因此,对我国禾谷镰刀菌产毒特点进行分析,并改进毒素检测方法,对我国麦制品中真菌毒素含量进行日常化的和标准化的检测,并发布相关毒素污染情况是非常必要的。 本研究从不同麦区分离并鉴定得到禾谷镰刀菌15个菌株,对其中6个产孢较好的菌株进行了产毒培养,并采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测了这些菌株的DON和ZEN的产量。结果表明,不同菌株产DON的水平有明显差异,并得到了产DON较高的1个菌株,而各菌株产ZEN的水平都很低。 为建立基于单链抗体的毒素检测新方法,研究摸索了合成酶标抗原DON-HRP和ZEN-HRP的方法,得到了既保持毒素的抗原性又保持HRP活性的酶标交联物,可初步用于毒素的检测,但需进一步完善。 对从福建、江苏、四川、河南和黑龙江等麦区采集的55个小麦样品用ELISA法进行了DON和ZEN两种毒素含量的检测。结果有36个样品检测出DON,含量范围在0.1-5.2ppm,其中17个样品的DON含量超过国家限量标准1ppm;共有29个样品检测出ZEN,含量范围在0.3-228 ppb,其中3个样品的ZEN含量超过国家限量标准100ppb。病麦粒较多的小麦样品中毒素含量比较高,而无明显病症的小麦样品中毒素含量较低或检测不到毒素,说明病害程度与毒素含量之间存在一定的相关性;而且各样品中DON的含量均明显高于ZEN,说明禾谷镰刀菌以产DON为主。 本研究结果可以为进一步利用毒素筛选抗病突变体和抗性鉴定,以及为开发高效灵敏且成本低的检测试剂盒提供借鉴。