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神经节苷脂(Gangliosides)是一类含唾液酸的鞘糖脂,存在于细胞膜的外表面。在胚胎形成、细胞分化、细胞增殖、转化和细胞转移等生理现象中发挥着重要作用。本文阐述了神经节苷脂GD1a的一种新的功能即诱导FBJ病毒感染的小鼠骨肉瘤细胞产生凋亡。在无血清培养条件下,富含GD1a的FBJ-S1细胞趋向死亡,而缺乏GD1a的FBJ-LL细胞却却未见明显影响。通过流式细胞仪对细胞进行膜联蛋白V异硫氰酸荧光素(FITC-AnnexinV)和碘化丙啶(PI)双染检测和细胞周期分析发现FBJ-S1细胞在无血清条件下趋向死亡是因凋亡而引起的。因此,我们推测GD1a可诱导FBJ细胞凋亡。为了验证这一推论,外源性GD1a在无血清培养条件下处理FBJ-LL细胞,发现FBJ-LL细胞出现死亡。FBJ-S1细胞通过加入葡萄糖苷神经酰胺合成酶抑制剂(D-PDMP)处理和转染入唾液酸转移酶(st3ga15)的siRNA的来抑制GD1a的合成,发现在无血清条件下经D-PDMP处理后FBJ-S1细胞抵抗死亡,且转染siRNA到FBJ-S1细胞后得到的单克隆细胞也同样抵抗死亡。另外,很多文章报道神经酰胺和神经节苷脂GD3可诱导凋亡,但在发生凋亡的FBJ细胞中神经酰胺的表达含量并没有变化,而GD3并未见在FBJ细胞中表达,这说明神经酰胺和GD3不是引起FBJ细胞凋亡的因素。窖蛋白1(caveolin-1,亦译为小窝蛋白1)是一种肿瘤抑制蛋白。本文研究发现,窖蛋白1参与了GD1a诱导的FBJ细胞凋亡并起着关键作用。FBJ-S1细胞在无血清条件下趋向死亡,而FBJ-LL细胞并未出现此现象,逆转录PCR法检测发现FBJ-S1细胞中窖蛋白1的表达量是FBJ-LL细胞的5倍。FBJ-LL细胞在外源性GD1a处理后促进其趋向死亡,免疫印迹法(Western blot)发现窖蛋白1的表达量也明显增加。另外,利用siRNA技术沉降FBJ-S1细胞中窖蛋白1的表达量,无血清培养条件下,结果使其存活。数据表明窖蛋白1可促进FBJ细胞的凋亡。存活蛋白(survivin,亦译为生存蛋白或生存素)是一种凋亡抑制蛋白,研究发现窖蛋白1可以调节存活蛋白,且存活蛋白也参与了GD1a诱导的FBJ细胞凋亡。生长因子。因此我们随机检测了FBJ-LL和FBJ-S1细胞中一些生长因子的mRNA水平表达,发现FBJ-LL细胞中生长因子如PDGFα,TNFα和VEGFβ的表达量是FBJ-S1细胞中的数倍,且FBJ-S1细胞在无血清培养基中加入PDGFα或TNFα培养后使其存活。数据表明内源性GDla可调节生长因子的表达同时也可诱导凋亡。另外,通过信号传导抑制剂和细胞内吞抑制剂来研究GDla诱导FBJ细胞凋亡的机制,发现p38MAPK途径和细胞内吞途径对GDla诱导的细胞凋亡发挥着重要作用。