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增生性瘢痕的防治目前仍是临床医生面临的重要难题之一。增生性瘢痕的形成主要是组织内成纤维细胞过量增殖和胶原纤维的过度沉积所致，在此过程中，各种炎症细胞和TGF-β、PDGF、FGF等多肽生长因子参与了其形成。放射治疗能够有效地抑制增生性瘢痕的形成。术后放疗已经成为目前增生性瘢痕和瘢痕瘤的重要治疗方法。放射治疗的剂量、时间、方式等若掌握不当，易造成皮肤和(或)深部组织损伤。国内外有关学者已经对瘢痕放射治疗进行了一系列的基础研究和临床观察，但尚缺少关于放射治疗过程中生长因子及其受体表达规律的研究，同时各地的放疗还缺乏公认统一的方案，既影响到瘢痕治疗的效果，又增加了临床并发症的发生。 目的意义：为了评价临床常用的几种治疗方案的效果，我们在制作大鼠创伤模型基础上，利用加速器产生的6Mev电子线按不同方案照射局部创面。通过动态研究照射后大鼠创伤愈合过程的病理改变和在此过程中转移生长因子β1(TGF-β1)、血小板衍生生长因子(PDGF)及其受体的表达，并在体外研究不同剂量照射后人胚肺成纤维细胞(HELF)和人脐静脉内皮细胞(ECV304)中TGF-β1、PDGF、FGF等及其受体表达的变化，进一步探讨加速器放射治疗增生性瘢痕的机理，为完善增生性瘢痕放射治疗方案并提高疗效提供病理学理论依据。 本研究密切结合临床目前常用的放疗方案，采用医用直线加速器产生的6Mev高能电子线，对大鼠创伤模型进行分次照射，观察伤口愈合的病理变化，免疫组化方法检测照射后组织内PDGF和TGF-β1含量的变化。同时以不同剂量照射体外培养的血管内皮细胞和成纤维细胞，研究其TGF-β1、PDGF、FGF及受体表达的变化规律。本研究对进一步阐明增生性瘢痕放疗的机理，以及指导临床采取合理、安全、有效的瘢痕治疗策略具有积极的意义。 材料和方法： 清洁级雄性Wistar大鼠36只，体重200±20g，随机分为四组，一组作为未照射空白对照组(9只)，三组作为照射组(各9只)，分组方法见下。经1％戊巴比妥钠30mg／kg腹腔注射麻醉后，在每只大鼠背部脊柱两侧切2个圆形创面，创面直径1.5cm，深达皮下组织全层，2个创面间隔1.5cm。处理完毕后以无菌纱布包扎伤口，动物置于单笼饲养。军事医学科学院硕士学位论文 术后48小时，将大鼠再次麻醉后固定于特制木板支架，利用直线加速器产生的6Mev电子线照射背部创口，照射野周围用铅板防护，照射剂量率为240eGy/min。分组300eGy组(15Gy/5次/sd，单次剂量300eGy，每日一次，连续照射5次)、4O0eGy组(20Gy/5次/sd，单次剂量400eGy，每日一次，连续照射5次)和500eGy组(15Gy/3次/sd，单次剂量500eGy，隔日一次，连续照射3次)各9只。 分别于照射前、照射开始后隔天一次观察创面愈合及渗出情况。对照组分别于致伤后Zd、sd、7d，10d，14d，Zld麻醉后取材，照射三组均在伤后7d，10d，14d，17d，21d，28d取材，将标本于4%甲醛液中固定。采用常规HE染色后进行病理组织学观察、天狼猩红染色后偏光镜观察胶原纤维含量变化、免疫组化方法和图象分析定性和定量检测各组伤口愈合过程中胶原纤维和TGF一pl、PDGF及其受体表达的动态变化。 将体外培养的人脐静脉内皮细胞株ECV3O4和人胚肺成纤维细胞各分两组，采用6Mev电子线，分别用20Gy、10Gy进行照射，剂量率为240eGy/分。继续培养，照后12h、24h、48h进行固定，免疫组化方法检测TGF一pl、PDGF、FGF及其受体的表达。结果:1、各照射组创面愈合延迟，对照组创面平均n天全部愈合，照射组平均 14天愈合。2、三照射组肉芽组织产生和胶原纤维的合成受抑制，与同期对照组比较 照射组肉芽组织层较薄，胶原纤维细小，含量较少。在早期SO0cGy组胶 原纤维较其余2组少，21天以后，胶原纤维较其余各组粗大，部分融合， 部分呈卷发状。3O0cGy照射组较其它各组胶原纤维细小，排列稀疏。3、照射组TGF一日1、PDGF一A及受体表达降低，高峰出现时间晚。对照组在 伤后7天达到高峰，明显高于各照射组。30ocGy与 40ocGy组均在7~10 天达到高峰，SOOcGy照射组表达高峰出现最晚，10一14天达到高峰，以 后逐渐降低，与其它各组同期相比较，显著升高。4、放射治疗的效果可能与单次照射剂量有关。300cGy组(15Gy/5次/sd，单 次剂量3O0cGy，每日一次，连续照射5次)对胶原形成和生长因子及受 体表达的抑制效应较400eGy组(20Gy/5次/sd，单次剂量400eGy，每日 一次，连续照射5次)与 500eGy组15Gy/3次/sd，单次剂量500eGy，隔 日一次，连续照射3次)为明显。5、照射后体外培养的ECV304细胞和HELF细胞TGF一日1、PDGF、FGF及受体 的表达均降低。单次剂量ZOGy照射后，TGF一旦1、PDGF、FGF及受体的 表达均较单次剂量10Gy明显减少。结论: 1、建立了加速器照射抑制瘫痕增生的实验模型。该模型能够较好的模拟加 速器照射后瘫痕形成的病理过程。军事医学科学院硕士学位论文2、加速器照射能够使创面愈合延迟，抑制胶原纤维和细胞间基质的合 成。3、加速器照射抑