人胚胎干细胞(human embryonic stem cells,h ESCs)是一类具有自我更新和在特定条件下可以分化得到三胚层的细胞群体,在基础科学研究中受到人们广泛的关注,而且具有潜在的临床应用价值。h ESCs分化得到的多种功能细胞是目前的研究热点,应用细胞疗法有望解决许多当前世界性的医学难题。hESCs冻存后复苏效率一直不高,这个问题制约着h ESCs的基础研究及临床转化。在冻存和复苏的过程中主要存在两方面损伤,包括机械损伤和溶质损伤,这两种损伤会破坏细胞器和细胞膜,进而引起细胞大量死亡。虽然有报道提到玻璃化冷冻法可以得到相对较高的冻存后复苏效率,但其操作技巧要求较高,仅适合保存种子细胞而难以在实践中大规模应用。本文基于常用的缓慢冻存和快速复苏的方法对h ESCs的冻存后复苏效率进行改进提高,为后期实验室的应用提供参考。眼睛是人类感知世界最重要的器官之一,眼部患病会给我们的生活带来极大的不便,而目前眼科疾病的常规治疗方法只能延缓视力下降的速度,最终仍会导致失明。眼科疾病发病率逐年升高,开发出新的治疗手段变得极为迫切。视网膜色素上皮细胞(retinal pigment epithelium,RPE)的损伤可以引起色素性视网膜炎(retinitis pigmentosa,RP)和老年性黄斑变性(age-related macular degeneration,AMD),由于其不能再生,可以通过后期注射细胞进行改善,这种细胞疗法目前已经在临床上进行试验,部分患者已经具有积极的效果。因此提高h ESCs向RPE的分化效率可以为以后临床需要提供更多的保障。