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目的:通过H1975和A431细胞的体外细胞增值抑制实验,从7个FCN系列表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)酪氨酸激酶抑制剂(tyrosine kinase inhibitors,TKIs)中筛选出高活性、高选择性化合物,并进一步评价其体内外抗肿瘤作用。方法:(1)首先采用MTS法对非小细胞肺癌(non-small-cell lung cancer,NSCLC)H1975细胞(T790M突变)进行体外增殖抑制试验对7个FCN系列化合物进行初步筛选,得到抗肿瘤活性强的化合物。(2)采用MTS法继续对初步筛选出来的3个高活性化合物在人表皮鳞癌A431细胞(WT-EGFR)中进行筛选,得到选择性更好的化合物。(3)采用流式细胞仪检测筛选化合对H1975细胞周期和凋亡的影响。(4)采用划痕实验观察筛选化合物对H1975细胞迁移能力的影响。(5)通过H1975细胞裸鼠移植瘤实验明确筛选化合物在体内对肿瘤生长的影响。结果:(1)与阳性对照物AZD9291对照,初步筛选出3个具有抑制H1975细胞增殖生长的高活性化合物:FCN12、FCN14和FCN15,半数抑制浓度(IC50)分别为(103.33±12.10)、(115.17±7.69)和(128.63±32.72)nmol·L-1,细胞抑制作用呈浓度依赖性。(2)经体外细胞抑制试验进一步筛选,与阳性对照物AZD9291对照,结果发现FCN12和FCN14对A431细胞无明显抑制作用(IC50>2μmol·L-1)。(3)经流式细胞仪检测结果显示:不同浓度的FCN12和FCN14对H1975细胞的周期分布不同,与DMSO对照组相比,均可显著将H1975细胞周期阻滞于G1期并呈浓度依赖性;同时FCN12和FCN14均可显著促进H1975细胞凋亡并呈浓度依赖性(P<0.01)。(4)划痕实验结果显示,与DMSO对照组比较,FCN12和FCN14对H1975细胞的迁移抑制作用明显,并与AZD9291相当,同时具有较好的浓度依赖性(P<0.05)。(5)体内移植瘤实验结果显示FCN12、FCN14可以明显抑制肿瘤的生长并缩小肿瘤体积(P<0.01)。结论:经过筛选得到的EGFR-TKIs:FCN12和FCN14,具有明显的体内外抗肿瘤活性并具有较好的选择性,对于治疗T790M型EGFR突变非小细胞肺癌具有良好的开发前景和市场应用价值。