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前言白血病细胞对化疗药物的不敏感或耐药是导致化疗失败及预后不良的重要原因,因此如何逆转耐药性成为众多研究者研究的热门话题。硼替佐米（bortezomib）是新型蛋白酶体抑制剂类药物,细胞实验发现其对多种肿瘤细胞有诱导调亡的作用,目前临床被应用于治疗复发及难治性多发性骨髓瘤。我们应用硼替佐米与柔红霉素（DNR）及表柔比星联合作用,观察其对耐药白血病细胞株K562/DNR的影响,探讨硼替佐米的逆转耐药作用。目的观察蛋白酶体抑制剂硼替佐米与常规化疗药物联合作用是否增加耐药白血病细胞株K562/DNR对化疗药物的敏感性。方法1、细胞培养:K562/S,K562/DNR细胞使用含有12%胎牛血清,100 U/ml的青霉素和100 ug/ml链霉素的RPMI-1640培养液,在37℃、5%CO2、饱和湿度条件下培养。细胞经多次传代后至指数生长期进行实验。2、MTT法测定硼替佐米的细胞毒性:不同浓度的硼替佐米作用于K562/DNR细胞株,药物对细胞生长抑制率%:1-实验孔A值/对照孔A值×100%,根据线性回归方程求得10%的细胞生长受到抑制所需药物浓度IC10。选取低于IC10的一个浓度,作为硼替佐米试验浓度,测定其与化疗药物联合应用对K562/DNR细胞生长的抑制作用。3、MTT法测定硼替佐米逆转耐药倍数:实验分组:1组K562/DNR+表柔比星;2组K562/DNR+表柔比星+硼替佐米;3组K562/DNR+柔红霉素;4组K562/DNR+柔红霉素+硼替佐米。取每组药液以10 ul/孔置于96孔酶标板中,检测每孔的吸收度A值。逆转倍数=耐药株IC50/加逆转剂后IC50。4、流式细胞仪检测细胞调亡。结果MTT法测得表柔比星单独作用于K562/DNR细胞株的IC50为417.0ug/ml,联合硼替佐米后IC50为210.4ug/ml,逆转倍数为1.98倍;柔红霉素单独作用于K562/DNR细胞株的IC50为457.7ug/ml,联合硼替佐米后IC50为324.9ug/ml,逆转倍数为1.4倍。流式细胞仪测得单独应用表柔比星组细胞调亡率为28.74±4.03%,联合硼替佐米组细胞调亡率为46.72±2.05%,两组有统计学差异。结论蛋白酶体抑制剂硼替佐米能增加耐药白血病细胞株K562/DNR对化疗药物的敏感性,能逆转耐药。