利用细胞信号转导和通讯机制检测胰高血糖素和皮质醇

来源 :山东大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xiaohengjun
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
本论文共分为三部分: 第一章我们通过双酶催化荧光分光光度计的方法实现了对葡萄糖的定量测定。我们运用了酶对底物的高选择性,GOD-HRP-ADHP反应体系催化无荧光的底物ADHP生成有荧光产物试卤灵的原理,葡萄糖被葡萄糖氧化酶(Glucose Oxidase,GOD)催化生成过氧化氢(H2O2),过氧化氢和10-乙酰基-3,7,二羟基吩嗪(10-Acetyl-3,7-dihydroxyphenoxazine,ADHP)在过氧化物酶(Horseradish Peroxidase,HRP)催化下产生荧光产物试卤灵。在此基础上,对激发波长、GOD的比活力、HRP的比活力、孵育时间等方面进行了最佳实验条件的讨论;最后在最佳实验条件下确定了双酶催化荧光底物检测葡萄糖的标准曲线、线性范围和检测限。 第二章中,我们研究了利用细胞信号转导机制实验了对胰高血糖素的定量检测。方法原理是:当胰高血糖素与细胞膜上专一性的蛋白质受体结合后,细胞膜上与受体偶联的腺苷酸环化酶催化ATP分解为cAMP和焦磷酸。由于细胞内cAMP浓度增高,最终引起糖原分解,使磷酸葡萄糖的含量急剧增加,以葡萄糖的形式释放到细胞外。再通过双酶(GOD-HRP-ADHP)催化反应测定肝细胞释放的葡萄糖测定溶液中的胰高血糖素的浓度。较高的细胞密度可以获得较高的信号放大倍数。以细胞密度为1.0×106个/mL的细胞的反应体系作为细胞传感器时,胰高血糖素的浓度信号被放大了约50倍。 第三章中,我们利用细胞信号转导和通讯机制实现了对皮质醇的定量检测。首先确定了胰高血糖素的标准溶液的标准曲线、线性范围和检测限。基于此我们利用皮质醇-胰腺细胞之间的信号通讯实现了对皮质醇的定量检测;然后运用皮质醇-胰腺细胞-肝细胞体系间的信号转导和通讯,通过检测最终释放出来的葡萄糖的量确定了皮质醇的标准曲线、线性范围和检测限。在这个过程中,皮质醇的信号被放大了134倍。
其他文献
分子光谱是一门古老而又充满活力的学科。一条谱线包含了三个方面的信息:频率(位置)、强度和线形。人们通过这三个方面的信息来了解分子结构、性质和内部相互作用,并广泛地应用
本文共分两部分:1.微反应器的构建、表征及结合扫描电化学显微术(Scanning Electrochemical Microscopy,SECM)的应用:II.扫描电化学显微术结合微反应器定量测定人单个中性粒细胞中
随着基因结构与基因功能研究的不断深入,特别是“人类基因组项目”的完成,人类疾病的DNA诊断及基因治疗的研究正进入一个新的纪元,而研究的基础,很大一部分在于对致病基因序列的
新型功能性高分子材料的制备及其在酶固定化方面的应用研究含有氨基、羟基、巯基以及其它功能性基团的高分子材料在生物分子(酶、多肽、抗体、抗原和DNA)的固定化方面有着独
旨在治疗疾病,减轻病人病痛的新药研发过程中,研究人员经常能够在具有特定活性骨架、活性基团和杰出生物活性的天然产物分子中得到灵感。尤其在人类与癌症抗争的漫长历史中,许多
用淀粉填充聚乳酸(PLA)可以得到成本较低的可完全生物降解材料,但两者间相容性不好导致简单共混物力学性能很差,必须进行增容改性。本文在双螺杆挤出机中制备了马来酸酐接枝聚
分子印迹技术是一种简便高效地制备对特定模板分子具有专一性识别性能的合成受体的方法,由其制备的分子印迹聚合物(MIPs)具有高度的选择性、良好的亲和性、优良的物化稳定性以
本工作主要采用差热分析法(DTA),结合相图理论论证及热力学计算,应用支持向量机(SVM)-原子参数模式识别法研究了CsF-RbF,RbF-RI,KIO-KNO二元系熔盐相图,同时本文在研究相图的基础
由于有机光电材料的广泛应用,设计合成新型的有机光电材料已成为人们关注的热点。 本论文选取呋喃和苯并咪唑两类化合物为研究对象,以设计合成新型有机光电材料的有机分子为
电信科学技术第四研究所(原名邮电部第四研究所,以下简称电信四所)创建于1964年,是我国邮电通信领域最早从事微波通信技术应用与开发的国家级专业研究所,主要从事无线通信、