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传统的黄曲霉毒素B1（AFB1）仪器分析方法,样品前处理步骤复杂、耗时长、不适合现场操作,而基于抗原抗体的胶体金免疫层析法虽然简单灵敏,但成本较高,且需要低温储运。核酸适配体试纸条是一种以核酸适配体结合侧向层析技术而研发的快速检测方法,在药物分析、食品安全、疾病诊断等领域都展现了很好的应用前景。目前核酸适配体试纸条一般采用适配体互补链竞争方式,由于核酸互补结合力常常大于适配体与靶标结合力,在适配体试纸条开发过程中,经常遇到核酸适配体的互补链选择困难问题。实验通过检测线（T线）处固定抗原代替互补链,此时适配体/靶标与适配体/抗原具有相同的结合力,用此同等竞争原理的思路解决了互补链选择困难问题,并且在控制线（C线）处固定适配体的全长互补链,竞争已经与靶标结合的适配体,形成T线/C线处双竞争模式,大大提高了检测的灵敏度与准确性。实验主要进行了以下几个方面的内容:1、论文首先设计了一种利用Cy5标记的适配体检测AFB1的试纸条,分别对各组件样品垫、硝酸纤维素膜（NC膜）、吸水垫和PVC底板进行了详细的优化选择。最后选择出一套适合荧光适配体试纸条的组件方案,即样品垫:上海杰一GL-b04型号（厚度为0.75）;NC膜:SartoriusCN140;吸水垫:H-4型号（厚度为0.3 mm）;底板:J-A6型号。组件的选择试验为试纸条获得高精确结果奠定了基础。2、通过优化检测条件与步骤,建立了AFB1荧光适配体试纸条检测的方法。最后选择结合性能好的AFB1-BSA抗原作为T线处的固定物,固定最佳浓度为252μg/mL;选择结合性能好的适配体完全互补序列作为C线处的固定物,固定最佳浓度为3μM;选择结合性能好的12个Poly（A）长度连接臂的荧光适配体,适配体最佳浓度为0.01μM;running buffer为含7.5%BSA的PB缓冲液（pH=7.4）。3、完成适配体试纸条检测性能的评价。试纸条的检测限为0.1 ng/mL,检测范围为0.1-1000ng/mL,批间批内稳定性好,对于其它霉菌毒素、抗生素、磺胺类药物、杀虫剂以及金属离子等靶标有很好的特异性,在食用油、谷物、饲料等11种样品基质中的添加线性良好,相关系数均大于0.95,并且检测结果与进口ROMER的ELISA试剂盒的结果具有非常好的一致性（y=1.0446x+2.1453,R2=0.9989）。本文研究不仅证明了基于适配体技术双竞争法原理试纸条的可行性,也为其它靶标的适配体试纸条的开发工作提供很好的参考借鉴。