论文部分内容阅读
激素在卵母细胞的体外成熟培养中是一种经常用的成分,虽然在试验中常有人在使用,但并没有人系统的就激素的种类,使用的剂量等研究过对卵母细胞的体外成熟培养的影响。本实验主要研究促卵泡刺激素（FSH）、促黄体生成素（LH）、雌二醇（E2）、孕马血清促性腺激素（PMSG）和人绒毛膜促性腺激素（HCG）对延边黄牛卵母细胞体外成熟及重组胚发育的影响,从而提高延边黄牛体细胞克隆的效率。利用屠宰后牛卵巢,用抽吸法回收卵母细胞,然后在不同种类、浓度激素条件下进行卵母细胞的体外成熟培养,最后将成熟的卵母细胞经核移植所构成的重组胚进行体外培养。得出的实验结果如下:1.在成熟液中添加不同浓度的FSH对延边黄牛卵母细胞体外成熟及体细胞克隆效率的影响的试验中,添加10μg/mL一组在卵母细胞成熟率、重组胚的卵裂率及囊胚发育率方面均显著高于其它浓度组（P＜0.05）,所以确定10μg/mL是单独使用FSH时最适合于延边黄牛卵母细胞体外成熟及体细胞克隆的最佳浓度。2.在成熟液中添加不同浓度的LH对延边黄牛卵母细胞体外成熟及体细胞克隆效率的影响的试验中,添加30μg/mL组在卵母细胞成熟率、重组胚的囊胚发育率方面均显著高于其它浓度组（P＜0.05）,所以确定30μg/mL是单独使用LH时最适合于延边黄牛卵母细胞体外成熟及体细胞克隆的最佳浓度。3.在成熟液中添加不同浓度的E2对延边黄牛卵母细胞体外成熟及体细胞克隆效率的影响的试验中,添加1.5μg/mL组的各个指标均优于其他浓度组,但差异不显著（P＞0.05）,所以确定1.5μg/mL是单独使用E2时最适合于延边黄牛卵母细胞体外成熟及体细胞克隆的最佳浓度。4.在成熟液中同时添加FSH、LH、E2对延边黄牛卵母细胞体外成熟及体细胞克隆效率的影响的试验中,同时添加共同作用组无论在卵母细胞成熟率,重组胚的卵裂率还是囊胚发育率都显著高于单独使用一种激素的效果（P＜0.05）。5.在成熟液中添加不同浓度的PMSG对延边黄牛卵母细胞体外成熟及体细胞克隆效率的影响的实验中,添加10IU/mL组在卵母细胞成熟率、8-16细胞率及囊胚发育率都好于其它各组,但差异不显著（P＞0.05）,所以确定10IU/mL是单独使用PMSG时最适合于延边黄牛卵母细胞体外成熟及体细胞克隆的最佳浓度。6.在成熟液中添加不同浓度的HCG对延边黄牛卵母细胞体外成熟及体细胞克滦实挠跋斓氖匝橹?添加15IU/mL组在卵母细胞成熟率、8-16细胞率及囊胚发育率方面都好于其它各组,但差异不显著（P＞0.05）,所以确定15IU/mL是单独使用HCG时最适合于延边黄牛卵母细胞体外成熟及体细胞克隆的最佳浓度7.在成熟液中同时添加PMSG、HCG对延边黄牛卵母细胞体外成熟及体细胞克隆效率的影响的试验中,同时添加共同作用组无论在卵母细胞成熟率,重组胚的卵裂率还是囊胚发育率都显著高于单独使用一种激素的效果（P＜0.05）。