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本试验以米糠为研究对象,麸皮为辅料,进行复合菌(酵母菌、枯草芽孢杆菌、植物乳杆菌)固态发酵,研究固态发酵对米糠抗氧化能力的影响,分析发酵米糠提取物(FRBE)的活性成分,并基于斑马鱼氧化应激模型探究了 FRBE抗氧化活性。为米糠的高附加值开发提供参考。论文主要包括以下三个部分。(1)固态发酵对米糠抗氧化活性影响以DPPH自由基清除率为指标,研究了发酵时间、含水率、腐植酸钠添加量、酶种类及酶添加量对米糠抗氧化活性的影响。结果表明,发酵时间为72 h,含水率为50%,腐植酸钠添加量0.5%,葡聚糖酶添加量为500 U时,复合菌发酵米糠的抗氧化活性最高,DPPH自由基清除率达85.55%。(2)发酵前后米糠提取物活性成分分析采用传统的水提法提取发酵米糠产物中的活性成分,以发酵米糠提取物的DPPH自由基清除率为指标,依次研究了提取时间,提取温度,料水比对其影响。结果发现提取时间为60 min,提取温度为85℃,料水比为1:20(g/mL)显著提高发酵米糠提取物的DPPH自由基清除率。水提物活性成分结果表明,与米糠提取物(RBE)相比较,FRBE中多酚、黄酮和蛋白含量显著提高(P<0.05),分别提高了 68.17%、80.29%和28.93%;多糖含量有明显下降(P<0.05),但FRBE的甘露糖比例显著提高。米糠酚酸主要由阿魏酸、咖啡酸和儿茶素组成,FRBE中含量阿魏酸、咖啡酸和儿茶素分别达718.75mg/kg、6.42 mg/kg和9.96 mg/kg,显著高于RBE。由此可见,发酵可以提高米糠多酚、黄酮等抗氧活性成分的可溶性,改变其单糖组成以及释放出更多游离酚酸。(3)发酵前后米糠提取物体内抗氧化活性评价研究不同浓度FRBE和RBE对偶氮二异丁脒盐酸盐(AAPH)诱导的斑马鱼活性氧(ROS)含量、脂质过氧化程度和细胞死亡率的影响,并测定斑马鱼胚胎过氧化氢酶(CAT)和超氧化物歧化酶(SOD)的活力。结果表明,FRBE对AAPH诱导产生的ROS、脂质过氧化和细胞死亡均有降低作用,且均高于RBE组。此外,FRBE可提高斑马鱼胚胎的抗氧化酶活性。说明米糠水提物对AAPH诱导的斑马鱼氧化应激具有缓解作用,且发酵提高了米糠的抗氧化活性。综上,菌酶协同发酵可以提高米糠的抗氧化能力,释放出更多游离的多酚、黄酮等活性成分,可以有效缓解AAPH诱导的斑马鱼氧化应激。