【摘 要】
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木质素是植物体中具重要生物功能的次生代谢产物。然而纸浆生产主要是将原料中的木质素与用于造纸的纤维素分离,该工艺过程产生了造纸工业的主要污染废液,并且增加造纸成本。
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木质素是植物体中具重要生物功能的次生代谢产物。然而纸浆生产主要是将原料中的木质素与用于造纸的纤维素分离,该工艺过程产生了造纸工业的主要污染废液,并且增加造纸成本。毛白杨是我国重要的造纸用树种,本研究目的在于利用转基因技术,在分子水平调节木质素的生物合成,降低中国特有造纸树种毛白杨的木质素含量,培育更适于我国造纸工业的原料树种。为了提高741毛白杨转基因频率,我们研究了几个对毛白杨转基因频率的影响因素。首先通过实验确定了毛白杨分化不定芽的适宜培养基,即MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L,附加蔗糖30g4L,琼脂6g4L,pH5.8。然后通过实验研究了卡那霉素对毛白杨叶片再生不定芽的影响。发现10mg4L的Km就完全抑制了毛白杨不定芽的再生,所以将10mg4L作为卡那霉素的筛选浓度,优化了毛白杨遗传转化体系,并获得了一批再生不定芽。本研究将741毛白杨反义4CL的五个基因通过加入酶切位点sac Ⅰ和Xba I与pBI121经过双酶切后连接构建了反义4CL-pBI121表达载体,然后将该表达载体转化入农杆菌LBA4404,利用农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导法,将反义4CL的五个基因转入741毛白杨。对获得的转基因植株进行了PCR检测,证实外源基因已插入毛白杨基因组中,并得到了抗性株系。
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