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目的:研究巨噬细胞移动抑制因子(Macrophage migration Inhibitory Factor,MIF)表达水平对乳腺癌MCF-7细胞系增殖和迁移、侵袭能力的影响并探讨其机制,构建BALB/c鼠移植瘤模型,探究MIF表达水平对BALB/c鼠移植瘤增殖能力和血管生成因子表达水平的影响及机制。方法:1.Cell Counting Kit-8(CCK-8)检测敲低MIF后MCF-7细胞增殖活力,流式细胞术检测细胞周期情况,Western blot法检测敲低MIF后MCF-7细胞Cyclin D1蛋白表达水平。2.划痕实验和Transwell实验检测敲低MIF对MCF-7细胞迁移和侵袭能力的影响,Western blot法检测MMP14蛋白表达水平。3.Western blot法检测下调因子MIF后,MAPK信号通路中P38、ERK蛋白磷酸化的情况。4.构建BALB/c裸小鼠移植瘤模型,测量肿瘤的体积、绘制肿瘤的生长曲线。5.Western blot法检测BALB/c鼠移植瘤组织MIF、p-P38和p-ERK蛋白的表达情况。6.免疫组织化学法检测敲低MIF后裸鼠移植瘤组织CD31和D2-40表达水平,进而评价微血管和微淋巴管数量。实时荧光定量PCR(Real-time quantitative reverse transcription polymerase chain reaction,Real-time PCR)检测BALB/c鼠移植瘤组织VEGF-A和VEGF-C的转录水平,Western blot法检测VEGF-A和VEGF-C的蛋白翻译水平。结果:1.siRNA有效阻断MCF-7乳腺癌细胞系MIF基因的转录和翻译后,细胞活力受到抑制,细胞周期停滞在G1-S期,Cyclin D1蛋白的表达水平也较MCF-7细胞有所下降。2.MIF表达降低的MCF-7乳腺癌细胞系穿过基底膜(无基质胶或有基质胶)的细胞数减少,MMP14蛋白表达水平也随之下降。3.低表达MIF的MCF-7细胞同时也降低MAPK信号转导通路上p-P38和p-ERK蛋白的磷酸化水平。4.用稳定低表达MIF的MCF-7细胞,建立的BALB/c鼠移植瘤模型与MCF-7乳腺癌细胞系建立的移植瘤模型相比较,前者移植瘤的生长较慢,体积较小。5.对低表达MIF细胞建立的BALB/c鼠移植瘤模型p-P38和p-ERK蛋白的磷酸化水平下降。6.低表达MIF细胞建立的BALB/c鼠移植瘤模型中VEGF-A和VEGF-C的转录和翻译水平均降低。微血管和微淋巴管密度计数明显少于对照组。结论:1.乳腺癌MCF-7细胞中MIF的表达水平与细胞的增殖、迁移和侵袭能力呈正相关,MAPK信号通路中的p-P38和p-ERK蛋白磷酸化可能对此过程起到促进作用。2.BALB/c鼠移植瘤MIF的表达水平与移植瘤的增殖和微血管及微淋巴管生成数呈正相关。