【摘 要】
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实验目的:通过建立间歇低氧大鼠模型,模拟睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)患者体内的间歇低氧状态,以临床上拥有确切疗效的消鼾利气颗粒作为治疗药物,评估该药物对于此模型大鼠PI3K/Akt信号通路的影响及对肺部炎症反应的作用,以探究消鼾利气颗粒对OSAHS可能的作用机制。研究方法:(1)制备间歇低氧动物舱。(2)SPF级SD雄性大鼠30只,随机分为空白组(NC)、中度模型组(IH-1)、轻度模型
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实验目的:通过建立间歇低氧大鼠模型,模拟睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)患者体内的间歇低氧状态,以临床上拥有确切疗效的消鼾利气颗粒作为治疗药物,评估该药物对于此模型大鼠PI3K/Akt信号通路的影响及对肺部炎症反应的作用,以探究消鼾利气颗粒对OSAHS可能的作用机制。研究方法:(1)制备间歇低氧动物舱。(2)SPF级SD雄性大鼠30只,随机分为空白组(NC)、中度模型组(IH-1)、轻度模型组(IH-2)、中度中药组(IH-3)、轻度中药组(IH-4)。适应性喂养一周后,除NC组外,其余各组每天放置低氧舱8小时,其余时间大鼠自由摄食、活动,共暴露5周。(3)造模5周后轻度中药组、中度中药组给予消鼾利气颗粒灌胃,其余各组予等剂量生理盐水灌胃。给药2周后处死动物,提取右肺肺泡灌洗液(BALF)检测白细胞总数及细胞分类计数;左肺固定后石蜡切片包埋,行HE染色观察各组大鼠肺组织的病理形态学变化;取右肺上叶行RT-qPCR检测,比较各组PI3K、Akt的mRNA相对表达情况;以免疫组化法测定PI3K、Akt的平均光密度值。研究结果:1.IH对实验动物一般情况的影响:与空白组相比IH组实验动物出现毛色暗淡、活动减少,反应迟钝,呼吸频率加快,胸腹矛盾运动等表现。经治疗后中药IH组上述情况有所减轻。2.IH对BALF沉渣中白细胞总数及细胞分类计数的影响:IH组BALF中白细胞总数均出现增长,与空白组相比具有统计学意义(P<0.05)。两不同程度的IH组间比较有显著差异(P<0.05)。消鼾利气颗粒对IH组的白细胞增长有明显的抑制作用(P<0.05),中药低氧组的白细胞总数仍高于空白组。各IH组相较空白组而言,中性粒细胞比例均出现增长(P<0.05),单核细胞比例出现下降(P<0.05),相较IH模型组,IH中药组中性粒细胞比例出现下降,单核细胞比例上升(P<0.05),但中性粒细胞比例仍高于空白组。各IH组淋巴细胞比例均明显有所上升(P<0.05),组间比较发现,除IH-3与IH-4,IH-2与IH-3外,其余各组两两比较均有明显统计学差异(P<0.05)。3.支气管与肺组织病理改变:HE染色显示各IH组实验动物肺组织均出现不同程度的炎性细胞浸润,中药IH组炎性细胞浸润程度较模型组明显减轻。4.免疫组化法检测蛋白表达水平:与空白组相比,IH模型组肺组织中PI3K、Akt表达明显升高(P<0.05),中药IH组与相应模型组相比AOD值均明显降低(P<0.01)。5.RT-qPCR检测:与空白组相比IH组的肺组织中PI3KmRNA、AktmRNA表达显著升高(P<0.01),与相应模型组相比,中药IH组中PI3KmRNA、AktmRNA表达显著降低(P<0.01),但仍高于空白组(P<0.05)。结论:PI3K/Akt信号通路的活化是间歇低氧作用引发肺组织炎症反应关键环节。消鼾利气颗粒可能通过抑制PI3K/Akt信号在细胞中的传导,减轻炎性细胞的浸润,缓解肺组织炎症反应,对OSAHS起到治疗作用。
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