紫花苜蓿是重要的豆科牧草之一。由于它改良土壤,保持水土而引起人们的广泛关注。我国苜蓿品种资源非常丰富,但是可消化率较低。如何提高苜蓿的可消化率,改良它的品质。是目前育种工作者的首要任务。本文介绍了在紫花苜蓿木质素合成代谢过程的主要酶4CL(4-coumarate:CoA ligase, 4一香豆酸辅酶A连接酶)基因的克隆,反向插入植物表达载体,并利用基因枪转化法将反义4CL基因转入紫花苜蓿中的全过程,结果表明:基因枪转化法简单易行,但是对设备有特殊的要求,且转化率较低,适于瞬时表达和整合表达的研究,Bio-Rad基因枪转化苜蓿的瞬时表达率为50%。利用基因枪将目的基因导入紫花苜蓿子叶中,在卡那霉素浓度为70mg/L选择培养基上,经过35天的继代和分化2次选择及45天连续3次选择后分化再生成植株。PCR结果表明,目的基因已导入并整合到紫花苜蓿基因组中,基因枪2次轰击的转化频率显著高于1次轰击和三次轰击。并且建立了紫花苜蓿组织培养体系。