实验背景及目的： 大部分严重的室性心律失常发生于冠心病和有过心肌梗塞（MI）病史的患者，急性心肌梗塞恢复期死亡患者中约50％死于心律失常事件，这种严重的室性心律失常是病残率和病死率的重要原因，因此也是电生理研究持续关注的热点。对梗塞后心肌电生理研究表明心室电活动及其传导有异常，这些异常是MI后室性心律失常的电学基质。动物实验表明一些β阻滞剂可防止冠脉结扎后室颤（VF）的发生，临床资料也表明，AMI后预防性应用β阻滞剂治疗，可显著降低VF的发生，降低总死亡率及心性猝死率。近年来，随着临床电生理技术及膜片箝技术的进展，对心肌梗塞后心室肌及细胞电生理的研究进一步深入，为探讨心肌梗塞后室性心律失常的发生机制提供了基础。 本实验通过建立MI兔模型，采用细胞分离，膜片钳及共聚焦显微镜等技术对慢性MI动物心室肌细胞离子通道电流的改变、心室肌细胞内钙离子浓度的改变及比索洛尔的影响进行研究，目的为探讨MI后室性心律失常的电生理异常及β阻滞剂的影响。方法与结果： 第四军医大学博土论文 一 本实验第一部分通过结扎兔左冠状动脉，术后24H内给予比索洛尔3周，建 立慢性m模型（m组）、药物治疗模型（0－8组）及对照组（印。组），采用 组织光镜检查、程序电刺激诱发心律失常、心律变异性测定等研究，结果：1．心 室组织光镜MI组有心肌坏死、疤痕形成，心外膜电图从梗塞中心区到周围正常 区，可见坏死Q波到正常电图的改变，表明模型建立成功。2．心率：P七组心 率较MI组和Sh。组有显著减低。左室舒张末压（LVED）：MI组LVEDP较Sham 组有显著增高，p－8组较Sh。组也有显著增高，但较＊组有所降低（p＜0．05）。 3．VT八F的诱发：MI组程序电刺激在 9／19 ．q动物中诱发 VF，其中 2只动物中 诱发非持续性单形 VT，D亿组在 2／20 ．q动物中诱发 VT／VF，较MI组显著减少。 Sham组动物未诱发出VT／VF。4．HRV指标：诱发VT／VF组的SDNN显著低于Sham 组（K0．05）；m组W显著低于ham组（K0．m）及p－8组（k0．05），诱发 VT／VF组的CV显著低于Sham组（P＜0．001）川I组LF／HF显著高于Sham组（P＜0．01） 及 pE组（P＜0．05），诱发 VT／VF组的 LF／HF显著高于 Sham组（P＜0．of）。5．心 室 ERP－D：MI组 ERP－D较 Sham组显著增高（P（．of），P亿组 ERP－D较 MI组显 著降低（W0．05），p－8组与加川组间m卜D无显著性差异。6 司梗塞区心室 肌细胞APD。、APD。的变化：MI组APD。显著长于Sham组（P＜0．05），p亿组APD。。 与Sham组无显著差异。MI组APD。显著也长于Sham组（P＜0．05），fi ＊组APD。 与Sham组无显著差异。 本实验第二部分采用tangen加n胶原酶灌流加浸泡法分离兔心室肌细胞， 分离出杆状、横纹清晰、细胞膜完整的具有典型特征的兔心室肌细胞。经KB 液保护lh，复钙后，显微镜下观察一些细胞有收缩，完全贴壁后收缩消失，形 态无明显变化。在有钙液中保存24小时，细胞仍平滑、清洁度好、细胞膜完整。 经台盼蓝染色，细胞成活率为 30—70兄细胞存活时间达 24h以上。膜片钳记 录到的钾电流。 本实验第三部分采用膜片钳全细胞记录方法对急性分离的兔心室肌细胞研 －6． 额四军医大学博土论文 一 究，结果 1．回 组心室肌细胞膜电容显著大于加am组巾狈．of人 p亿组饺 MI 组显著减小（P＜0．05），与Sham组仍有显著差异（P＜0．05）。2．L型钙电流I。、： MI组I＊电流峰值显著高于Shan组，6o组与Sham组间无显著差异。但经膜 电容标化后，I。、电流密度三组间无显著差异，I个曲线呈典型“铃型”曲线。 3．瞬时外向钾电流It。：MI组Ip电流密度显著低于ShM组，6亿组较MI组升 高，仍低于Sh。组，但与Sham组无显著差异。4．内向整流钾电流乙，：三组间 1。；电流密度无显著差异。 本实验第四部分采用FIUO｛／AN作为钙指示剂，用激光扫描共聚焦显微镜测 定急性分离的兔心室肌细胞内钙浓度。对细胞负载n UO七／AN后的细胞内游离 Ca’”图象观察发现，MI心室肌细胞荧光强度明显强于 Sham组及i亿组心室肌细 胞的荧光强度。皿心室肌细胞荧光密度明显强于Sham组及p七组心室肌细胞的 荧光密度。从细胞内游离 Caz”定量图分析，MI心室肌细胞平均荧