重组人促红细胞生成素促进周围神经缺损修复的研究

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背景以及目的周围神经缺损的治疗一直是医学的一大难题,目前的金标准是自体神经移植替代,但依然存在供体缺乏以及供体神经支配区功能障碍等缺陷,因此自体神经的替代载体成为研究的热点。甲壳素及其衍生物能促进内皮细胞生长,利于血管再生,减少瘢痕形成,已经成为自体神经的可靠替代载体。但是单独应用甲壳素导管有其局限性,它不能有效促进雪旺式细胞的再生与增值。促红细胞生成素(EPO)除了具有系统造血的作用以外,对神经系统损伤的修复也起着重要作用,其不但对中枢神经系统有明显的促进神经发育、提供保护、营养和再生的作用,对雪旺细胞的增值也有促进作用,因此对周围神经损伤的修复也会有一定作用。但具体机理尚不是分清楚。以甲壳素导管为载体应用重组人促红细胞生成素(rh-EPO)修复周围神经的研究鲜有报道。本实验探讨二者对大鼠坐骨神经缺损的修复作用及其机制,为治疗周围神经损伤与缺损提供科学的依据。实验方法选择健康雌性SD大鼠60只,随机分为3组,每组20只,制备大鼠双侧坐骨神经缺损模型(1cm缺损)以及可吸收甲壳素神经再生室。A组:为实验组,甲壳素再生室内注入聚乳酸-聚乙醇酸-rh-EPO微球20μ L;B组:为对照组,甲壳素再生室内注入聚乳酸-聚乙醇酸微球20u L;C组:为空白对照组,甲壳素再生室内注入等渗生理盐水20μL。术后6周、12周分别对动物标本进行神经功能指数(评估神经电生理以及动作电位传导速度)、组织学结构(Loyes染色和免疫组织化学染色)等检查,并对其结果进行统计学分析。实验结果1.6周后大体观各组甲壳素导管内均有新生的组织,甲壳素导管未被完全吸收,缺损的神经被新生组织填充,大量的纤维组织包括其表面,能见新生毛细血管;12周可见少量甲壳素导管崩解碎片,未见甲壳素导管,纤维组织明显减少,可见大量毛细血管。2.神经电生理检查表明:实验组再生神经的传导速度(6周:14.3±2.02;12周:37.25±2.00)优于对照组(6周:13.24±1.92;12周:21.02±2.01)、空白对照组(6周:11.30±1.98;12周:19.65±1.98),且12周明显优于6周,其差异有统计学意义(P<0.05)。对照组、空白对照组的再生神经传导速度差别无统计学意义,组间比较结果显示(P>0.0167)(组间多重比较行Bonferroni法检验,取校正=0.016713.S-100免疫组织化学显示:实验组神经纤维数量(6周:365.15±41.20;12周:512.00±34.12)多于对照组(6周:261.23±40.11;12周:452.12±45.23)、空白对照组(6周:251.58±29.55;12周:436.21±41.58),12周明显多于6周,其差异有统计学意义(P<0.05),但是对照组、空白对照组再生神经纤维数差别无统计学意义,组间比较结果显示(P>0.0167)。各项检测指标结果表明,实验组优于对照组;实验组和对照组优于空白组。4. Loyez氏神经染色法结果显示:实验组神经纤维数量(6周:540.00±112.33;12周:987.25±100.12)高于对照组(6周:373.00±81.24;12周:512.65±71.45)和空白对照组(6周:347.00±62.26;12周:499.21±62.13),而且12周明显多于6周,其差异有统计学意义(P<0.05)。结果表明:rh-EPO凝胶用于治疗周围神经缺损疗效优于对照组和空白对照组。结论1.甲壳素导管能促进神经生长且无异物反应,是神经再生室的一种理想生物材料。2.甲壳素导管中注入rh-EPO凝胶可以促进实验性神经缺损后施万细胞的增殖。3.甲壳素导管中注入rh-EPO凝胶能够促进实验性坐骨神经缺损的再生和功能的恢复。
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