【摘 要】
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目的：
检测人视网膜内皮细胞(human retinal endothelial cells，HRECs)在中高糖、高糖、缺氧情况下增殖的情况以及蛋白激酶C(protein kinase C，PKC)五种亚型(α、δ、ε、
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目的：
检测人视网膜内皮细胞(human retinal endothelial cells，HRECs)在中高糖、高糖、缺氧情况下增殖的情况以及蛋白激酶C(protein kinase C，PKC)五种亚型(α、δ、ε、βⅠ、βⅡ)在转位激活情况，观察PKC各亚型转位激活在糖尿病情况下人视网膜内皮细胞增殖中的作用，为探索PKC亚型在糖尿病视网膜病的发病机制中的作用，为药物防治糖尿病视网膜病变提供新的靶点。
方法：
采用MTT方法检测中高糖、高糖、缺氧情况下HRECs增殖的状况，运用梯度离心法分离全细胞为细胞浆、细胞膜两种组分，采用免疫印迹(Westernblotting)法检测PKC各亚型蛋白的转位激活情况，并采用免疫荧光(Immunofluorescence)法证实免疫印迹的结果，再用MTT方法检测PKC亚型抑制剂对中高糖、缺氧时HRECs增殖的作用，证明PKC亚型在HRECs增殖中的作用。
结果：
1. MTT方法显示中高糖和缺氧能使HRECs增殖，而高糖未引起增殖。
2.免疫印迹法显示PKCδ在中糖情况下自胞浆转位至胞膜，PKCα、PKCε在高糖情况下自胞浆转位至胞膜，PKCβⅠ在中糖、高糖、缺氧情况下均能自胞浆转位至胞膜，PKCβⅡ没有转位。
3.免疫荧光方法显示与上述结果一致。
4. MTT方法显示PKCδ抑制剂卡马拉素能抑制中高糖诱导的HRECs增殖，但不能抑制缺氧诱导的HRECs增殖。
结论：
1.中高糖和缺氧能使HRECs增殖，而高糖不引起增殖。
2.PKCδ的转位与中高糖引起的HRECs增殖显著相关，而缺氧引起的HRECs增殖可能与PKC亚型的转位无关。
3.PKCα、ε、βⅠ与中高糖和缺氧引起的HRECs增殖无关。
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