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本文以啤酒废酵母为原料,研究了富核糖核酸啤酒酵母菌体的制备,核糖核酸的提取、酶解和5’-核苷酸的分离纯化等工艺。对啤酒酵母富集RNA的培养基进行了优化,运用Plackett-Burman法确定出了（NH4）2SO4、酵母膏、NaCl为重要影响因素;然后通过最陡爬坡实验逼近最佳响应面区域;最后采用Box-Behnken设计和SAS软件分析确定出主要因素的最优添加量,得到最佳培养基为:酵母添加量为培养基重量比的30%,葡萄糖4 g,（NH4）2SO4 5.8 g,酵母膏0.28 g,牛肉膏0.3 g, KH2PO4 0.3 g,MgSO4 0.03 g, ZnSO4 0.001 g,NaCl 4.77 g,水定溶至100 mL;通过对处理条件的研究,得到处理条件为:酵母浓度30%,装液量50 mL/250 mL三角瓶,转速150 r/min,处理温度20℃,处理时间7 h。经过优化后,啤酒废酵母RNA含量从4.175%提高到7.723%,提高了85.0%。通过对RNA提取条件的研究,得到了浓盐法提取啤酒废酵母中RNA的最优工艺为:反应时间5 h,反应温度100℃,氯化钠浓度8%,酵母浓度8%,反应温度是最显著影响因子。在该条件下测得RNA的抽提量为6.68 g/100g干酵母,收率为94.08%,OD260/OD280为2.01。从麦芽根中提取5’-磷酸二酯酶,酶解RNA生产四种5’-核苷酸工艺条件为:底物RNA浓度1.8%,5’-磷酸二酯酶加量2000 U/gRNA,pH 6.8,70℃作用2.0 h,4种5’-核苷酸的总转化率为87.3%。对酶解产物5’-核苷酸进行了分离纯化,利用201×7离子交换树脂分离四种核苷酸,研究了上样量、洗脱液流速、pH等因素对5’-核苷酸分离纯化的影响,四种核苷酸都得到了很好的分离,回收率在80%以上。