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神经胶质瘤是中枢神经系统最为常见的肿瘤,导致神经胶质瘤恶性程度高和易复发的因素主要有两个方面：胶质瘤内高度增生的新生血管和胶质瘤中广泛存在的间质细胞。间质细胞中,巨噬细胞作为一种特殊的免疫细胞引起了人们的广泛关注,巨噬细胞活化后可分为两种不同的亚型,经典激活型(M1)和选择激活型(M2)。A类清道夫受体(Class A scavenger receptor, SR-A)是一种主要表达于巨噬细胞的模式识别受体,在机体的自然免疫中发挥重要作用。SR-A还与多种疾病的发生密切相关,其调控的异常是许多疾病的重要病理生理学基础。现有的研究表明,SR-A与多种恶性肿瘤的发生发展密切相关,然而SR-A在神经胶质瘤中的作用尚未明确。本课题拟以神经胶质瘤微环境为模型,研究SR-A对肿瘤相关性巨噬细胞极化的调控,及其对神经胶质瘤生长的影响,并且寻找胶质瘤微环境中SR-A潜在的内源性配体,为神经胶质瘤的治疗提供新的治疗靶点。为了阐明巨噬细胞源性SR-A对神经胶质瘤的作用,本课题组利用Trans-well系统将鼠源性神经胶质瘤细胞GL261与SR-A+/+和SR-A-/-巨噬细胞进行共培养,分别检测了SR-A+/+和SR-A-/-巨噬细胞对于GL261细胞的增殖、迁移和侵袭能力的改变。结果发现,SR-A敲除后,GL261的增殖、迁移和侵袭能力均明显增强。接着,我们又用RT-PCR和流式的方法检测两组巨噬细胞的极化情况,观察到巨噬细胞上SR-A缺失后,向M2型的极化增加,向M1型的极化减少；并且检测到巨噬细胞上SR-A缺失后,巨噬细胞内经典的M2型信号通路STAT3、6的磷酸化活性明显增强,从而介导巨噬细胞向M2型极化。此后,我们构建了SR-A+/+小鼠原位脑胶质瘤模型,在3周后通过MRI观察到造模成功,随后分离出SR-A+/+成瘤小鼠脑组织及假手术组野生型小鼠脑肿瘤组织间质中的蛋白质,且按照其不同密度分组刺激SR-A+/+和SR-A-/-巨噬细胞,用RT-PCR分析两组巨噬细胞中细胞因子的分泌情况,发现某些密度组分中存在着特异性通过SR-A介导巨噬细胞极化的蛋白质,并用凝胶电泳的方法对这些梯度中的蛋白质进行分离,接着用质谱分析存在表达差异的蛋白成分,检测到野生型胶质瘤成模小鼠与假手术组野生型小鼠相比,脑肿瘤组织间质中多种蛋白的表达量明显增加,并结合相关文献报道,初步怀疑热休克蛋白家族可能作为巨噬细胞上SR-A潜在的内源性配体,并参与对神经胶质瘤微环境的调控。接着我们用HSP70、HSP60、HSP40分别刺激SR-A+/+和SR-A-/-巨噬细胞,用RT-PCR检测各组巨噬细胞M1型细胞因子的表达,发现HSP70刺激后SR-A+/+巨噬细胞IL-1、IL-6、TNF-α、iNOS等因子的表达明显增加,随后在蛋白水平对此结果进行验证。接着,我们又用流式证明了在SR-A存在的情况下,HSP70可以显著地诱导巨噬细胞向M1型极化。为了进一步验证HSP70对神经胶质细胞功能的影响,我们又将GL261与HSP70预处理的SR-A+/+和SR-A-/-巨噬细胞共培养,观察到经过HSP70处理的SR-A+/+巨噬细胞共培养体系中GL261迁移和侵袭能力均有所减弱。总之,本研究证明了巨噬细胞源性SR-A能通过调控巨噬细胞极化从而影响神经胶质瘤的功能,在体外模拟的肿瘤微环境中,巨噬细胞上SR-A缺失后能诱导巨噬细胞向M2型极化,从而促进肿瘤的增殖、迁移和侵袭。同时我们还发现胶质瘤间质中的HSP70能通过SR-A介导巨噬细胞向M1型极化从而抑制胶质瘤细胞的增殖、侵袭和迁移能力,因此,HSP70可能是胶质瘤微环境中潜在的SR-A内源性抗肿瘤配体,有望成为未来神经胶质瘤治疗的新靶标。