青光眼是全球主要的致盲性眼病，也是我国首位不可逆的致盲性眼病。了解青光眼的发病机制，对其进行早期诊断、早期治疗，是研究青光眼的重点课题。ELAM-1是目前发现的唯一的青光眼特异性分子标记，对ELAM-1的研究将加深对青光眼发病机制的了解。 到目前为止，ELAM-1的研究主要在血管疾病中进行。考虑到小梁网和血管在结构、功能和病理机制上的相似性，我们借鉴血管性疾病研究的成熟方法，研究小梁细胞中ELAM-1的产生及作用机制，以及其产生和作用过程中伴随的信号传导过程的改变，推测ELAM-1在青光眼发病机制中的作用。 实验分为三个部分。 一、房水外流通路ELAM-1表达的研究 目的：氧化应激、眼压或血压升高分别是青光眼和血管性疾病的主要危险因素。在血管疾病中ELAM-1的表达与液体压力梯度和氧化应激有关，因此我们研究氧化应激和高眼压对小梁细胞ELAM-1表达的影响，了解是否ELAM-1的表达与IL-1a有关，试图发现青光眼特异性表达ELAM-1的机制。 材料和方法：将原代培养的猪小梁细胞血清饥饿培养16小时，分成对照组、H₂O₂组和拮抗剂IL-1ra组。IL-1ra组再根据加入IL-1ra的浓度分成若干亚组。对照组用无血清培养基培养，H₂O₂组用1mM的H₂O₂刺激，各拮抗剂IL-1ra组先用2ug／ml、8ug／ml、32ug／ml、64ug／ml、180ug／ml和600ug／ml的IL-1ra预处理过夜后，用1mM的H₂O₂刺激；30分钟后免疫组化法检测小梁细胞ELAM-1的表达；流量恒定眼前节灌流培养成功的猪眼前节24只，分成0、10、20和30mmHg组，培养2～72小时后中性甲醛固定，免疫组化法检测小梁细胞ELAM-1的表达。提取对照组、H₂O₂组细胞以及灌流培养眼前节的各眼压组小梁网的总RNA，RT-PCR法检测IL-1a mRNA的表达，观察小梁细胞表达ELAM-1过程中，内源性IL-1amRNA水平的改变。 结果：在原代培养的猪小梁细胞中，对照组ELAM-1表达阴性，H₂O₂组和2ug／ml、8ug／ml、32ug／ml和64ug／ml浓度的拮抗剂IL-1ra亚组ELAM-1表达阳性，