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由青枯病菌引起的番茄青枯病(TBW)是全球范围内最严重的细菌性病害之一。由于其寄主范围广并能够在土壤中长时间生存,至今尚无一种防治方法能在病害流行区对其进行有效控制。生物防治与其他防治方法相结合被证明具有持久、环保的特点,并且能够保障农业生态系统的生产力和稳定性。本研究从番茄和马铃薯的根际土壤中分离到约200个根际细菌,并测定它们对青枯病菌T-91的拮抗作用,在离体试验中,Am1, Am2, Am5, Am50, Am47, D11, D12, D16, D29和H810株菌株表现出了高潜力的拮抗活性。在温室条件下,进一步筛选它们对青枯病菌的生防效果。结果发现,使用Am1, D16, D29和H8菌株处理的番茄植株,青枯病的发病率减少至81.1%-89.0%。与未处理组比较显著(P>0.05)增加了番茄的株高(22.7%-43.7%)和干重(47.93%-91.55%)并能有效抑制土传真菌赤霉病菌,瓜果腐霉菌和立枯丝核菌。采用16S rRNA基因序列、生理和生化测试、脂肪酸甲酯分析对这4株拮抗细菌菌进行鉴定,结果表明Aml和D29为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens),D16和H8分别为枯草芽孢杆菌(B. subtilis)和甲基营养型芽孢杆菌(B. methylotrophicus)。为评估枯草芽孢杆菌4812和甲基营养型芽孢杆菌H8单独使用或结合两种植物防御诱导剂乙酰水杨酸(ASA)和DL-β-氨基丁酸(BABA)使用时的生防效果,分别在离体和活体条件下测试了它们对青枯病菌的抑制作用。结果表明,在温室和离体条件下,所有处理均对青枯菌具有显著的抑制作用。在离体条件下,H8+ASA和4812+H8被认为是最有效的处理。将处理剂在番茄种子上施用并浸泡土壤时,H8对该病害的抑制作用最强,而4812+H8+ASA的抑制作用最弱。此外,使用4812+H8,H8+ASA和4812+H8+ASA处理的植物中检测到高活性的苯丙氨酸解氨酶。使用H8,4812+H8和H8+ASA处理的植物中检测到过氧化物酶和多酚氧化酶的表达量最高。实时定量PCR结果证实,所有处理组的植物茎组织中的病菌浓度均显著降低,其中H8+ASA是最有效的处理组合。生物活性机制研究显示,解淀粉芽孢杆菌Am1和D29,枯草芽孢杆菌D16和甲基营养型芽孢杆菌H8这4株菌都能产生吲哚乙酸和铁载体,而不产生氰化氢。此外,D29,AM1和H8都具有溶解磷的能力。芽孢杆菌菌株既具有形成生物膜的能力,也具有溶解和破坏青枯病菌生物膜的能力。常规PCR分析结果显示,这4株菌都具有合成脂肽的基因(bmyB,fenD,ituC,srfA和bacA),这些基因分别表达合成Bacillomycin,Fengycin,Iturin,Surfactin和Bacilysin.在温室试验中,分别观察到处理组的番茄植株的IAA含量,鲜重与干重之间存在正相关(0.777和0.686)的关系。