抗凝血灭鼠剂是世界上广泛使用的一类化学灭鼠剂,但鼠类很容易对其产生抗性。抗药靶基因Vkorc1(维生素K环氧化物还原酶复合体,亚单位1基因)上的突变是鼠类抗性产生的主要机制,也是鼠类抗性检测的主要分子标记。已有数据显示,我国在用药30多年后褐家鼠中已经出现抗性,2010年湛江种群的抗性率达21.6%。然而,目前关于我国褐家鼠的Vkorc1多态性的研究都还是空白。另外,虽然Vkorc1突变是鼠类产生杀鼠灵抗性的主要机制,但有研究发现个别抗性鼠并不携带Vkorc1抗性突变,表明还存在其他未知的抗性产生机制。基于以上问题和研究现状,本论文对我国褐家鼠的Vkorc1多态性进行了大范围多种群的调查,并利用实验室不携带Vkorc1抗性突变的敏感鼠探索其他的抗性机制,具体从以下四个方面展开研究:1.重点分析了湛江和哈尔滨2008~2015年连续8年的641只褐家鼠Vkorc1多态性及其与抗性的相关性。结果显示,共存在3种新突变,包括1种氨基酸突变Ala140Thr(频率为0~4.0%)和2种同义突变His68His、Leu105Leu;哈尔滨和湛江种群生理抗性率分别为0%和5~17%,试验种群中检测到的突变His68His、Ile105Ile与抗性没有相关性。Vkorc1多态性和生理抗性检测的结果都支持两地褐家鼠种群抗性水平低。2.分析了来自我国24个省的491只褐家鼠Vkorc1多态性。结果显示,仅在广东湛江和河北保定发现可能与抗性相关的氨基酸突变Ala140Thr和Cys96Tyr,说明我国大多数地区褐家鼠种群的抗性率比较低。欧洲褐家鼠至少携带9种不同的抗性突变,基因流分析结果支持褐家鼠种群从我国北部扩散到东南亚,然后快速扩散到欧洲,说明这9种抗性突变不是随种群扩散的古老多态性,更像是种群扩散到欧洲后独立起源。3.为了探索抗性产生的其它可能机制,利用亚致死剂量的杀鼠灵逐代筛选实验室敏感褐家鼠(sF0代;不携带抗性Vkorc1突变)。经过连续6代(sF0~sF5)筛选,存活率逐代提高,并且5.7~7.1%的sF3~sF5代表现出明显的抗性表型,说明褐家鼠的抗性可以被诱导,并传递给后代成功建立了耐药褐家鼠模型。4.比较分析了敏感鼠(uF5)、耐药鼠(sF5)和杀鼠灵刺激后的强耐药鼠(sF5R)的肝脏转录组。结果显示,耐药鼠与敏感鼠相比,先天免疫相关基因的差异表达提高了其耐药本底;强耐药鼠与耐药鼠相比,在受到杀鼠灵刺激后,耐药雌鼠中药物代谢、解毒、凝血、创伤愈合等多个生理过程的基因表达会发生显著变化,耐药雄鼠则通过改变蛋白质和脂质等多个代谢途径的基因表达间接应对,初步阐明了可塑性耐药表型的分子调控机制。综上所述,本论文发现我国褐家鼠缺乏靶基因Vkorc1抗性突变,大多数地区褐家鼠种群的抗性水平较低,低毒的第一代抗凝血类灭鼠剂对我国的褐家鼠种群仍然有效。通过亚致死剂量杀鼠灵逐代诱导敏感褐家鼠建立了不依赖于Vkorc1突变的耐药种群,并发现这种耐药性的提高与先天免疫相关基因的差异表达有关,但具体发挥作用的方式仍需要进一步的实验进行功能验证。