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高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(Highly pathogenic PRRSV,HP-PRRSV)是一种严重危害养猪业的传染病,不同品种猪对HP-PRRSV存在抗性(或易感性)差异为抗病育种提供了有价值的研究材料。为研究抗性(或易感性)差异可能的机制,本实验以前期感染试验筛选得到两个对HP-PRRSV抗性(或易感性)存在较大差异的品种长白猪(易感型)、通城猪(抗病型)为材料,利用流式技术研究了感染前、感染后各时期两个品种猪肺泡巨噬细胞(Porcine alveolar macrophages,PAMs)凋亡率、受体CD169蛋白表达以及CD169+巨噬细胞数量的变化,利用Q-PCR技术分析了两个品种PAMs中凋亡相关基因P53、Bcl2L1、Bax和受体基因CD169转录水平差异,利用免疫组化的方法比较两个品种肺组织中CD169+巨噬细胞数量差异。另外,为筛选PRRSV抗性(易感性)相关基因,本实验还构建了有PiggyBac(PB)转座子插入的Marc145突变细胞库,为进一步利用病毒感染筛选抗性或易感性相关基因打下了基础。主要研究结果如下:1、感染HP-PRRSV后两个品种猪PAMs凋亡率的变化趋势基本一致,都经历了降低升高再降低的波动过程,在感染第7天通城猪PAMs凋亡率显著低于长白。2、随着HP-PRRSV感染时间的延长,凋亡基因P53基因表达在长白猪和通城猪中均呈下调趋势,基因表达在两个品种之间无显著差异。在感染HP-PRRSV前通城猪Bax和Bcl2L1基因表达均显著高于长白猪;在感染第3天,Bax和Bcl2L1基因表达在两个品种间无显著差异;在感染第5天通城猪Bax和Bcl2L1基因表达均显著低于长白猪;在感染第7天通城猪Bcl2L1基因表达高于长白猪,而Bax表达在两个品种间无差异。3、随着HP-PRRSV感染时间的延长,两个品种猪CD169表达呈下调的趋势。感染HP-PRRSV的不同时期通城猪PAMsCD169基因转录和翻译水平均高于长白猪。4、两个品种感染HP-PRRSV后CD169+PAMs占肺泡灌洗细胞比例显著下降,在感染第3天下降到最低点。感染前通城猪CD169+PAMs比例高于长白猪。通城猪和长白猪肺组织中的CD169+PAMs数量没有差异。5、确定了PB转座子(pHi5)在Marc145细胞中发生转座的最佳条件,筛选得到一批有PB稳定插入基因组的Marc145细胞。