作为恶性肿瘤相关死亡的主要原因,肺癌是目前威胁人类健康的首要问题。一项统计报道,2006年,美国肺癌的发病人数为174,470。非小细胞肺癌占肺癌总数的70%-80%,因此,对非小细胞肺癌的治疗将是医务工作者的一个挑战。大多癌症相关死亡的原因主要是肿瘤细胞的转移,而淋巴结是肿瘤最常见的转移部位。众所周知,区域性淋巴结转移是非小细胞肺癌最常见的转移方式,即使是在早期的非小细胞肺癌中也是如此。也就是说,‘N’的状况是肺癌分期和临床治疗的主要决定因素。肿瘤细胞一旦出现前哨淋巴结的转移,它们将进一步向远处的淋巴结扩散。TNM系统通常是用来评价肿瘤进展、淋巴结转移及远处转移的主要模式,一些临床研究已证实,淋巴系统的侵犯是非小细胞肺癌的主要预后因素,因此,淋巴系统将成为非小细胞肺癌治疗和诊断的新的靶点。血管生成是肿瘤生长和转移的必须条件已为被广泛接受,局部无血管生成,肿瘤生长至2mm3将不再生长。另外,血管生成与原发性肿瘤的转移有关已有报道,临床研究也已证实血管生成与人类肿瘤的转移有关,预后不良。近年来,一些研究表明,淋巴管生成也与肿瘤的转移有关,因此,对血管生成与淋巴管生成的了解和调控可能是肿瘤治疗的有效的策略。然而,几十年来由于缺乏人类肿瘤的淋巴管可信的标记物和淋巴管生成因子,淋巴系统转移的机制仍不清楚,使得我们对淋巴系统知识的了解滞后于对血管系统的了解。近来,由于分子生物学的进步,揭示了肿瘤淋巴系统转移的机制。血管内皮生长因子(VEGF)家族,其编码成员有VEGF-A, -B, -C, -D, and–E,及其受体家族,因为它们具有能够促进肿瘤的生长和转移的血管生成和淋巴管生成的特性,被认为是一组非常重要的生长因子和受体。血管内皮生长因子-C通过与受体VEGFR-3 (也称为Flt-4)及VEGFR-2间的信号传导,具有血管生成和淋巴管生成的生长因子作用。在血管内皮生长因子受体家族成员中,Flt-4,也就是VEGFR-3,是VEGF-C和VEGF-D的受体。在胚胎时期,Flt-4可以在所有胚胎内皮表达,而在成年以后,其表达明显受到限制,主要表达于淋巴管内皮细胞。近来的研究中已将其作为淋巴内皮细胞的标记物,也发现在多种人类肿瘤中表达。实验研究表明肿瘤通过释放VEGF-C或VEGF-D而激活Flt-4诱导淋巴管形成,从而促使淋巴结的转移。抑制了Flt-4的信号传导可以抑制淋巴管的形成和淋巴结的转移。既然如此,Flt-4可以作为多种恶性肿瘤的诊断和治疗的靶点。然而,在非小细胞肺癌中,仅有少数临床研究与VEGF-C (或VEGF-D),和Flt-4有关报道,而且有关VEGF-C (或VEGF-D),和Flt-4在肿瘤细胞和/或内皮细胞表达的意义尚存争议,尤其是VEGF-C (或VEGF-D),和Flt-4在内皮细胞的表达与肿瘤预后的意义。因此,我们采用半定量PCR及Western blot方法,对VEGF-C以及VEGFR-3 mRNA及蛋白在非小细胞肺癌的表达进行评估,评价其与非小细胞肺癌病人的临床病理因素相互之间的关系,包括淋巴结转移的情况。自2006年12月至2007年6月,相继有78例病理分期为I-IIIA期非小细胞肺癌病人在北京胸科医院接受了外科手术治疗,并对其组织标本234份应用半定量PCR及171份应用Western blot的方法进行了研究。术后病理分期根据1997年重新修订的TNM分期进行再分期,对其不同的病理类型、分期、分化程度及其他临床特性与VEGF-C和VEGFR-3mRNA及蛋白的表达进行分析。1.半定量PCR测定结果:VEGF-C mRNA在癌组织及癌旁组织的相对含量明显高于正常组织(VEGF-C mRNA 0.302±0.177, 0.209±0.131, 0.152±0.89, P<0.05),Flt-4在癌组织中的相对含量明显高于正常组织(0.278±0.182 vs 0.181±0.128,P<0.05),在癌旁中的相对含量也高于正常组织,但无统计学意义(0.199±0.128 vs 0.181±0.128, P> 0.05)。VEGF-C和Flt-4 mRNA的表达与临床病理特性相互之间的关系显示,在淋巴结转移组及病理分期组,VEGF-C或Flt-4 mRNA的表达水平无论是在癌组织中,还是在癌旁组织中均有明显统计学意义,P<0.001。而在不同分化程度分组中,VEGF-C和Flt-4 mRNA的表达仅在癌旁组织中有统计学意义,与其他临床病理因素无明显相关性。2.Western blot测定结果:在78例非小细胞肺癌病人中,对57例病人共171例组织标本进行了癌组织、癌周及肺正常组织VEGF-C的蛋白水平测定,VEGF-C的蛋白表达水平在癌组织、癌周及正常组织中的表达量分别为0.631±0.300 ,0.502±0.246, 0.531±0.286,其中癌组织的VEGF-C的蛋白水平表达与正常组织中的表达有明显统计学意义,P=0.000,而癌组织与癌旁组织、癌旁组织与正常组织中VEGF-C的蛋白表达水平无统计学差异,P=0.201。与所有临床病理因素之间的相互关系,均无明显统计学意义。本实验研究证实,VEGF-C mRNA在癌组织及癌旁组织的相对含量明显高于正常组织,而且VEGF-C及Flt-4 mRNA的表达与肿瘤的淋巴结转移及分期有关,针对VEGF-C/ Flt-4的靶向治疗可能对肿瘤是有意义的,因此对VEGF-C/ Flt-4有调节作用的因子的不断发现及其特性的不断了解,是限制肿瘤的扩散一种必要的新的方法,特别是发现能够阻断VEGF-C/ Flt-4信号传导的新药,可能为抗肿瘤治疗提供一种有用的方法。