赖型钩端螺旋体外膜脂蛋白LipL41基因的克降及表达

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该研究以017株LIPL41基因为目的基因,克隆人原核细胞高效融合表达质粒pGEX1λT和真核细胞表达质粒pcDNA3,分别构建重组质粒,并进行LipL41基因的表达分析.通过SDS-PAGE和Western blotting检测,结果证明LipL41在原核细胞大肠杆菌中可高效表达,并可与抗钩体多价抗血清产生阳性印迹;真核重组表达质粒转染真核哺乳动物细胞COS7后,通过RT-PCR检验,证实了LipL41在真核哺乳动物细胞COS7中也能有效地表达.该研究构建了原核和真核细胞表达质粒,并在原核和真核细胞中获得高表达,为进一步进行钩体DNA疫苗和基因工程亚单位疫苗进行探索性研究,为钩体DNA疫苗和蛋白成分共免疫以增加免疫效应的设想提供新的实验依据.
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