枣树组织培养诱变育种研究

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以组培枣苗为材料,通过组培结合诱变,以期研究枣树组织培养诱变育种问题并筛选出多倍体变异株系,为枣树组织培养育种奠定理论与实践基础。主要研究内容如下:1、以组培试管枣苗为材料,以秋水仙碱浓度与作用时间为试验因子,采用两因素随机区组实验设计,研究秋水仙对枣树组培苗的诱变效果。结果表明:各处理均有非二倍体产生,说明研究秋水仙对组培试管枣苗有较好的诱变作用;试验筛选出了各品种组培枣苗较适宜的处理组合:其中,狗头枣为秋水仙碱10mg/l、处理45天或50mg/l处理30天,诱变率均为33.3%;骏枣为秋水仙碱30mg/l、处理30天,诱变率为40.0%;木枣为秋水仙碱30mg/l、处理45天,诱变率可达46.7%。2、以诱变产生的四倍体变异株系和二倍体株系组培苗(对照)为材料,用形态观察法、叶面积法、气孔法等方法鉴别二者的差异。结果表明:四倍体变异株系比之二倍体普遍表现出叶片变大、变厚、变圆,叶色变深,叶表面皱缩粗糙;二倍体试管枣苗的气孔密度明显地多于四倍体变异株系,其中,狗头枣二倍体是其诱变四倍体的2.05倍,骏枣二倍体是其诱变四倍体的1.95倍,木枣二倍体是其诱变四倍体的1.92倍;多倍体的叶面积明显大于二倍体,其中狗头枣四倍体变异株叶面积为其二倍体的1.78倍,骏枣四倍体变异株叶面积为其二倍体的1.33倍,木枣四倍体变异株叶面积为其二倍体的2.59倍;四倍体变异株系气孔保卫细胞叶绿体数量明显多于二倍体,其中,狗头枣四倍体变异株气孔保卫细胞叶绿体数量为其二倍体的1.55倍,骏枣四倍体变异株气孔保卫细胞叶绿体数量为其二倍体的1.90倍,木枣四倍体变异株气孔保卫细胞叶绿体数量为其二倍体的2.23倍。3、以初选的多倍体变异株系和二倍体株系(对照)为材料。用石蜡切片法制片,经镜检观察二者的差异。结果表明:四倍体植株普遍表现出叶片增厚,栅栏组织、海绵组织发达,茎尖分生层的三层细胞均大于原二倍体。4、以初选的多倍体变异株系和二倍体株系(对照)为材料,采用酸解去壁低渗法和酶解去壁低渗法研究四倍体变异株系和二倍体株系在细胞遗传学上的差异。结果表明:两种方法都得到了清晰的染色体图像;从狗头枣、骏枣、木枣三种枣树组培苗诱变获得的可稳定培养的多倍体变异株系的染色体数目均为2n=4x=48,与原二倍体2n=2x=24比较,确定为三种四倍体变异株系。5、以经过筛选后确定的三种四倍体变异株系为材料,以外源植物激素为主要处理因素,研究建立四倍体变异株系的块繁体系。结果表明:适合狗头枣四倍体继代培养的培养基为6-BA0.5 +IBA0.2,增值系数为1.96;适合骏枣、木枣四倍体继代培养的培养基均为6-BA0.5 +IBA0.1,增值系数分别为2.03、2.1;适合狗头枣和木枣四倍体生根的培养基均为6-BA0.3 +IAA0.2,生根率分别达100%和82.2%;适合骏枣四倍体生根的培养基为6-BA1.0 +IBA0.3,生根率达100%。
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