【摘 要】
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该文研究采用酵母Pichia.pastoris表达系统,实现了VEGF的高效分泌型表达,并对表达产物进行了初步纯化,采用细胞生物学的方法对纯化后的重组VEGF的生物学活性进行了研究.研究
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该文研究采用酵母Pichia.pastoris表达系统,实现了VEGF<,165>的高效分泌型表达,并对表达产物进行了初步纯化,采用细胞生物学的方法对纯化后的重组VEGF的生物学活性进行了研究.研究表明,通过Pichia.pastoris系统构建的VEGF<,165>分泌型表达工程菌株在以甲醇为诱导物的培养基中可以进行高效分泌型表达,目的蛋白占培养液上清总量的80﹪以上,产量可达到0.45g/L.目的蛋白经肝素亲合层析进行了初步纯化,纯化后的蛋白纯度达90﹪以上.纯化后的重组VEGF<,165>经MTT法和[<3>H]标记的胸腺嘧啶检测法实具有促进血管内皮细胞增殖的生物学活性.
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