黑果枸杞ISSR分析、良种繁殖与新种质创制

来源 :内蒙古农业大学 | 被引量 : 2次 | 上传用户:syj19630113
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黑果枸杞(Lyciumruthenium Murr.)为茄科(Soanaceae)枸杞属(Lycium L.)多年生灌木,在中国西北地区分布较广,因其果实中富含多种营养成分,素有植物“软黄金”和野生“蓝色妖姬”的美誉。本研究以采自不同地区的24份黑果枸杞资源为材料进行了 ISSR-PCR扩增,分析其遗传多样性;以阿拉善地区的黑果枸杞材料当年生枝条和种子为外植体,通过初代、继代、生根培养对其进行离体组织培养与快繁,并用不同浓度秋水仙素对阿拉善二倍体黑果枸杞种子进行了诱导处理,对诱导后的材料进行倍性鉴定及核型检测分析,旨在为黑果枸杞种质资源的遗传分类、多倍体种质资源创制和染色体倍性育种等提供遗传学基础依据。主要研究结果如下:(1)从已公布的ISSR通用引物中随机选取30条筛选出了 1 1条适宜引物,分析了供试材料的遗传多样性,共扩增出138条清晰明亮的条带,其中多态性条带数131条(95.20%)。每个引物扩增平均条带数和多态性条带数分别为12.5和11.9条,遗传相似系数在0.154~0.971之间,平均遗传系数为0.445,在阈值0.52处,可分为3大类。(2)以阿拉善黑果枸杞当年生枝条为外植体,筛选出适宜诱导愈伤组织的培养基:1/2MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L+5.5g/L 琼脂+30g/L 蔗糖;不定芽增殖培养基:WPM+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L+5.5g/L 琼脂+30g/L 蔗糖;生根培养基:WPM+IBA0.5 mg/L+5.5g/L 琼脂+30g/L 蔗糖。(3)以种子为外植体,适宜诱导无菌苗培养基:WPM基本培养基;适宜无菌苗微扦插繁殖培养基:WPM+IBA 0.5 mg/L+5.5g/L琼脂+30g/L蔗糖。(4)采用浓度0.2%的秋水仙素溶液处理阿拉善二倍体黑果枸杞供试材料48h,能有效地诱导出四倍体材料,最高诱导率为22.2%。(5)与二倍体供试料(2n=2x=12=6sm+18m)相比,四倍体植株叶子变长变宽、株高变矮、生长变慢,气孔明显增大、气孔密度降低、叶绿体数增多,其核型公式为2n=4x=48=12sm+36m,属于“2A”型,其相对DNA含量(100)是二倍体材料(50)的二倍。
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