沙棘(Hippophae rhamnoides L.)是胡颓子科沙棘属植物,目前在中国、印度以及俄罗斯等国家广泛种植,在我国主要分布于山西、内蒙古、辽宁、新疆、西藏等省份。现代药理研究表明沙棘具有显著的调节血脂、抗炎、抗氧化、降血糖、抗菌、抗肿瘤等重要药理活性。但是目前对沙棘的应用开发一般集中在沙棘果实,而沙棘叶这一重要资源除少部分被应用于沙棘茶中,剩余大量则被作为废物遗弃,造成极大的资源浪费。白雀木醇作为一种肌醇的甲醚衍生物具有重要的潜在降糖活性,是一种极具利用价值的天然活性成分,研究数据证实白雀木醇在沙棘叶中含量丰富,我们对沙棘叶中白雀木醇的制备以及活性进行系统研究,可以为沙棘叶的利用和深加工提供理论支撑。本研究借助现代天然产物分析技术以及活性研究手段,从提取工艺、分离纯化、结构鉴定和活性评价方面对沙棘叶中白雀木醇进行了系统探究,主要研究结果如下:1.建立并评价沙棘叶中白雀木醇的测试方法为了寻找一种方便快捷、定量准确的白雀木醇测试方法,我们对比了气相色谱法(GC)以及液相色谱法(LC)两种方法发现,LC法不仅对白雀木醇选择性好定量准确度高,而且操作也更为简便快捷。进一步对LC法系统的考察,发现该方法仪器精密度高(RSD值<1%)、准确度高(加标回收率在95.9%-98.7%范围,RSD值<2%)重复性好(RSD值<2%),可以对沙棘叶中白雀木醇进行准确定量。2.沙棘叶白雀木醇分布规律探究采集甘肃、辽宁两个省份,5月份至9月份5个不同月份的沙棘叶样品,对不同地域不同生长阶段沙棘叶中白雀木醇含量变化规律进行探索。结果发现两省份样品中白雀木醇含量皆呈现出不断积累增长的趋势,9月份采摘的沙棘叶样品中白雀木醇含量达到最高(64.70-73.27mg/g干叶)。3.沙棘叶中白雀木醇的提取工艺优化采用超声波辅助溶剂法制备沙棘叶白雀木醇,以沙棘叶粉碎度、料液比以及提取时间为影响因素,以白雀木醇得率为评价指标进行单因素以及响应面试验,优化沙棘叶白雀木醇的提取工艺。研究结果显示:当沙棘叶粉碎度20目,料液比1:8,提取时间40min时,白雀木醇的得率较高,为5.18%。4.沙棘叶中白雀木醇的分离纯化及未知化合物成分鉴定在以上最佳提取工艺得到沙棘叶粗提物的基础上,选用大孔树脂、葡聚糖凝胶柱等柱色谱技术,优选纯化方法,优化纯化条件,最终得到白雀木醇纯度为72.7%的沙棘叶纯化物。为了鉴定纯化物中的未知成分,利用气相色谱质谱联用(GC-MS)技术、全二维气相色谱/飞行时间质谱联用(GC×GC-TOF-MS)技术以及超高效液相色谱-四级杆飞行时间高分辨质谱联用(UHPLC-Q-TOF-MS/MS)技术三种精密分析手段对纯化物中未知成分进行结构鉴定,为后续活性实验提供数据支撑。结果显示,白雀木醇以外,共鉴定出13种未知化合物,分别为:1,3-苯二甲酸、1,4-苯二甲酸、塔格呋喃糖、半乳糖、葡萄糖、甘露糖、古洛糖、来苏糖、2-O-L-亮氨酰d-D-吡喃葡萄糖、1,5-脱水-1-[(4-羟基丁基)氨基]甲基-D-己糖醇、2-O-[2-(苄基氨基)-2-氧乙基]-α-d-D-吡喃葡萄糖、2-羟基-2-甲基丁酸甲酯和正丁醛。5.沙棘叶白雀木醇体外降糖评价探究了白雀木醇标准品以及沙棘叶纯化物对α-淀粉酶的抑制活性,结果表明,两者的抑制类型均为竞争性抑制,其中,白雀木醇标准品对α-淀粉酶的IC50为0.604mg/mL,沙棘叶纯化物的IC50为2.407mg(纯化物)/mL。通过Hep-G2细胞胰岛素抵抗模型研究表明,白雀木醇标准品和沙棘叶纯化物均可有效改善模型细胞的胰岛素抵抗状态,增加模型细胞的葡萄糖摄入量,并随着药物浓度的增加,摄入量也随之增加。其中,白雀木醇标准品浓度为20μg/mL时,即可表现出显著促进增加效果,而沙棘叶纯化物则在药物浓度为4μg/mL,可达到显著增加葡萄糖摄入量效果。