RhoGDI2基因及人脐静脉内皮细胞对T24膀胱癌细胞侵袭、迁移及增殖的影响

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目的:膀胱癌是我国泌尿系肿瘤当中最常见的恶性肿瘤,易浸润、转移是膀胱癌最主要的特征。RhoGTP酶GDP解离抑制因子2(rho GDP dissociation inhibitor2,RhoGDI2)是近年来发现的抑制肿瘤迁移的基因之一,其在高迁移潜能的膀胱癌细胞中的表达量显著低于低迁移潜能细胞。内皮细胞一般对肿瘤均是促进作用,如果将RhoGDI2基因和人脐静脉内皮细胞放在一起,到底是促进大于抑制呢,还是抑制大于促进呢?本实验便是观察在人脐静脉内皮细胞共培养的Transwell模型下,RhoGDI2基因对人膀胱癌T24细胞的侵袭、迁移及增殖的影响。  方法:设计并合成含有RhoGDI2基因过表达的GFP慢病毒载体,利用western blotting技术检测RhoGDI2基因在 LV-RhoGDI2-GFP/T24、LV-CONTROL-GFP/T24、T24三组蛋白水平表达之间的差异。利用Transwell模型和Matrigel基质胶检测三组细胞的侵袭能力的差异,利用Transwell模型检测三组细胞的迁移能力的差异,利用Transwell模型和CCK-8试剂检测三组细胞的增殖能力的差异。  结果:本研究成功构建了RhoGDI2基因的慢病毒载体,western blotting技术检测到LV-RhoGDI2-GFP/T24的RhoGDI2的蛋白表达量明显高于LV-CONTROL-GFP/T24和T24组(P<0.05);在Transwell侵袭实验当中,无论是非共培养组还是共培养组,LV-RhoGDI2-GFP/T24组的侵袭的细胞数目明显少于LV-CONTROL-GFP/T24组及T24组(P<0.05)。而各自细胞系自身的非共培养组和共培养组的比较当中,LV-RhoGDI2-GFP/T24非共培养组侵袭的细胞数和LV-RhoGDI2-GFP/T24共培养组侵袭的细胞数目无差异(P>0.05),但是LV-CONTROL-GFP/T24非共培养组和T24非共培养组的侵袭的细胞数明显少于LV-CONTROL-GFP/T24共培养组和T24共培养组(P<0.05)。在Transwell迁移实验当中,无论是非共培养组还是共培养组,LV-RhoGDI2-GFP/T24组的侵袭的细胞数目明显少于LV-CONTROL-GFP/T24组及T24组(P<0.05)。而各自细胞系自身的非共培养组和共培养组的比较当中,LV-RhoGDI2-GFP/T24非共培养组侵袭的细胞数和LV-RhoGDI2-GFP/T24共培养组侵袭的细胞数目无差异(P>0.05),但是LV-CONTROL-GFP/T24非共培养组和T24非共培养组的侵袭的细胞数明显少于LV-CONTROL-GFP/T24共培养组和T24共培养组(P<0.05)。在增殖能力实验当中,无论是非共培养组还是共培养组,在第二天开始,LV-RhoGDI2-GFP/T24组的OD值明显小于LV-CONTROL-GFP/T24组及T24组(P<0.05)。而各自细胞系自身的非共培养组和共培养组的比较当中,在第三天开始,LV-RhoGDI2-GFP/T24非共培养组OD值和LV-RhoGDI2-GFP/T24共培养组的OD值无差异(P>0.05),但是LV-CONTROL-GFP/T24非共培养组和T24非共培养组的OD值明显小于LV-CONTROL-GFP/T24共培养组和T24共培养组(P<0.05)。  结论:RhoGDI2基因对T24膀胱癌的侵袭、迁移及增殖能力均有抑制作用;人脐静脉内皮细胞对T24膀胱癌细胞的侵袭、迁移及增殖能力均有促进作用;RhoGDI2基因可以“阻断”人脐静脉内皮细胞对T24膀胱癌的侵袭、迁移及增殖能力的促进作用。
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