RNAi技术沉默AcMNPVp35基因的初步研究

来源 :华中师范大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:cxzclong
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
RNA沉默(RNA-Silencing)包括动物RNA干扰(RNA interference,RNAi)、真菌的抑制(quelling)、植物中的转录后基因沉默(posttranscriptional genesilencing,PTGS)和协同抑制(cosuppression)等,是一种基于靶序列特异性和RNA降解的基因表达调节机制,在真核生物免疫外源遗传因子(转座子、转基因或病毒)和调节r内源基因表达的过程中起着重要作用。 RNA沉默的效应物是核酸,无论外源exogenous或内源的核酸在体内都转变为21-27nt的小RNA(small RNA)信号分子来指导RNA沉默。这些小RNA包括微小RNA(microRNA,miRNA)、干扰性小RNA(small interfering RNA,siRNA)和重复相关干扰RNA(repeat-associated small interfering RNA,rasiRNA),小RNA分子指导RNA沉默效应(effector)复合物(如RNA诱导的沉默复合体(RNA-inducedsilencing complex,RISC)、转录后基因沉默复合体(RNA-induced initiation oftranscriptional gene silencing,RITS))的装配,最后,含有小RNA的效应复合物使目的基因的mRNA发生转录水平或转录后的沉默。 研究发现AcMNPV的p35基因具有抗凋亡anti-apoptosis特性,缺失knock downAcMNPV中的p35基因将引起induce AcMNPV感染的细胞凋亡。本文将p35基因的部分序列构建到pLITMUS28i质粒中,重组载体pLITMUS-p35在体外转录褪火形成dsRNA。当dsRNA导入到AcMNPV感染的sf9细胞后,我们没有观察到很明显的细胞凋亡现象,原因可能为我们质脂体的转染效率不高。因此我们还需要不断地摸索RNAi技术。
其他文献
ML(MD-2-related lipid-recognition,ML)家族是含有ML单一结构域的蛋白家族,广泛存在于动物、植物和真菌等生物体内,成员包括MD-1(myeloid differentiation protein-1,MD-1)、MD-
本文通过腹腔注射和饵料添加两种给药方式,分别研究了胸腺素α1对斜带石斑鱼的生长和免疫两方面的影响,结果总结如下: 1、通过腹腔注射不同浓度的人工合成的胸腺素α1,分别在
竹子的木质素与纤维素含量受遗传、竹种、地域和环境等因素影响较大,进而影响其制浆性能和成纸特性等。本研究比较分析了四川省不同地区慈竹和硬头黄的遗传多样性,木质素与纤维
目前国内外对生物质气化洸焦废水的微生物处理鲜有报道,尚无成熟的工程治理技术和完善的处理工艺。利用理化和生物处理相结合的方法,可提高生物质气化洗焦废水COD的降解效率。该研究首先进行了生物质气化洗焦废水和焦油可否被微生物降解的尝试。结果证明,微生物具有降解生物质气化洗焦废水和焦油COD的能力,但降解速度较慢,一般需4-6d,且底物浓度很低。在证明微生物可降解生物质气化洗焦废水和焦油COD后,为了提高
豆科植物能与根瘤菌形成共生根瘤将氮气转化为氨。由根瘤菌Ⅲ型分泌系统泌出的Ⅲ型蛋白效应因子在寄主特异性结瘤中起着非常重要的作用。NopL(nodulation outer protein L)是
水稻纹枯病是水稻三大病害之一,近年来纹枯病危害面积迅速扩大,危害程度急剧加重,已严重影响水稻的产量和品质,因此对水稻纹枯病的防治已迫在眉睫。由于引起水稻纹枯病的立枯丝核
Nong8、Nong4是Bar基因分别插入在受体小麦B染色体组和D染色体组上的转Bar基因小麦,本文以转Bar基因小麦及其与当地常规品种的杂交F_1代为材料,以NO_3~-/NH_4~+比例为3:1和1:3的两种不同混和氮源为营养,结合小麦在苗期及生育后期氮代谢和光合特性的研究,探讨不同氮源比例及Bar基因插入位点对转Bar基因小麦及其F_1代产量性状造成差异的原因,以期为转Bar基因小麦的氮源营
β-内啡肽是一种重要的神经肽,近年来人们发现β-内啡肽在免疫系统内发挥重要生理功能.本实验采用免疫组织化学定位的方法在广大扁玉螺(Neverita reiniana)的神经节、口球、
目的:1.通过离体培养大鼠星形胶质细胞,观察P物质对星形胶质细胞的活化作用,包括细胞形态学观察和对IL-1β和IL-10释放量的检测。2.通过P物质作用于离体培养的星形胶质细胞,
本研究从广东省实验动物饲养行业的实际需求出发,通过对珠江三角洲地区各科研单位实验动物垫料的来源及使用情况进行调研,选择常用、且来源丰富的松木刨花、枫木刨花、纸皮(纸