鸡传染性支气管炎病毒（Infectious bronchitis virus,IBV）是基因组为27.6 kb的单链正向RNA病毒,属于γ型冠状病毒。IBV引起家禽高度传染性、急性呼吸道疾病,造成养禽业严重经济损失。对IBV的致病机制深入探究有利于开发具有针对性的靶向药物。细胞焦亡是Gasdermins（GSDMs）蛋白依赖性的炎性细胞程序性死亡（PCD）,是抗病毒感染的重要机制。研究表明IBV与宿主细胞相互作用能够引起细胞凋亡、自噬,IBV感染与细胞焦亡之间的联系目前尚未见详细报道。本研究旨在探明:IBV感染诱导鸡巨噬细胞焦亡的分子机制;Caspase-8对IBV诱导焦亡的影响;IBV引起的ROS积累与细胞焦亡之间的联系。MTT法、乳酸脱氢酶（LDH）释放量检测和碘化丙啶（PI）染色发现IBV感染会导致细胞活力降低、LDH释放量上升以及PI阳性细胞率增高;倒置显微镜、扫描电子显微镜（SEM）和透射电子显微镜（TEM）观察发现IBV感染导致细胞形态和超微结构呈现焦亡特征;RT-q PCR和Western Blot检测结果表明IBV感染能够激活Caspase-3/DFNA5通路;利用RNA干扰下调DFNA5,发现感染病毒的细胞死亡减少,LDH释放量也明显降低。推测IBV感染通过Caspase-3/DFNA5介导HD11细胞焦亡。通过JC-1染色,RT-q PCR检测和凋亡相关基因Caspase-8/9/3、Bid、Bax、Bak、Cyt C、和Parp以及Western Blot检测Caspase-8/9/3、Bax和Cyt C,我们发现IBV感染导致线粒体膜电位下降,并且上调细胞凋亡相关基因m RNA和蛋白表达水平。使用Caspase-8抑制剂预处理感染细胞,我们发现细胞死亡明显减少,凋亡关键分子和DFNA5的激活被抑制,表明Caspase-8是联系IBV和继发于内源性凋亡的焦亡之间的关键分子。此外,RT-q PCR和ELISA检测发现Caspase-8抑制剂显著降低IL-1β转录水平和IL-1β的分泌。以上结果说明Caspase-8激活能够促进IBV感染诱导的继发性焦亡。DCFH-DA探针检测细胞内活性氧（ROS）发现IBV感染诱导细胞内ROS积累。ROS抑制剂NAC处理病毒感染的细胞,发现ROS被抑制后细胞肿胀和死亡减轻,LDH释放量降低,内源性凋亡相关基因和DFNA5的m RNA水平显著降低,部分关键蛋白包括DFNA5、Caspase-3/8的剪切体以及Bax表达水平降低。以上结果表明IBV可能通过ROS激活内源性凋亡触发Caspase-3/DFNA5介导的细胞焦亡。综上所述,IBV感染通过ROS介导Caspase-8/Caspase-3/DFNA5通路引起细胞焦亡,上述致病机制为开发靶向抗病毒药物提供理论基础。