过量表达Lsi1增强水稻抗UV-B辐射机制的初步研究

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本研究以对UV-B辐射敏感的水稻品种Dular为材料,通过生物信息学手段获得水稻Lsil基因的开放阅读框(ORF)序列,以此序列为模板,扩增获得水稻Lsil基因的ORF;将此ORF连接到基因过量表达载体Ubiquitin1301上,获得含有Lsil基因的Ubiquitin1301重组质粒(Lsil-Ubiquitin1301),将Lsil-Ubiquitin1301转化进入农杆菌EHA105;运用农杆菌介导的遗传转化获得 Lsil基因过量表达的UV-B敏感水稻Dular的突变体,以野生型Dular为对照材料,通过半定量RT-PCR检测发现,Lsil过量表达的UV-B敏感水稻Dular叶片的苯丙氨酸解氨酶(PAL)基因和光复活酶(Photolyase)基因均增强表达;增强UV-B辐射能够进一步增强PAL及Photolyase基因的表达量,且高于相同处理条件下的野生型Dular水稻;与此同时,Lsil过量表达的Dular水稻叶片的总酚、总黄酮等具有吸收UV-B能力的次生物质的含量均增加,且增强UV-B辐射能够显著提高其含量,并高于UV-B辐射下的野生型Dular水稻。此结果表明,过量表达水稻的Lsil基因能够通过增强表达次生代谢相关基因及DNA修复相关基因的表达,促进水稻叶片中吸收UV-B的次生物质的含量上升以及提高修复UV-B损伤的能力,进而提高水稻对UV-B辐射的防御能力,此研究结果为运用分子遗传学手段培育高抗UV-B水稻品种提供理论依据。
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