鼠疫是由鼠疫耶尔森氏菌(以下简称鼠疫菌)引起的一种自然疫源性烈性传染病。在人类历史上,曾经发生过3次世界鼠疫大流行,给人类带来过深重灾难。新中国成立后，鼠疫疫情虽得到有效控制，但近年来，世界鼠疫疫情呈上升趋势，2000年世界卫生组织将鼠疫列为重新抬头的传染病。我国鼠疫自然疫源地分布广泛，动物鼠疫流行面积不断扩大，人间鼠疫病例不断增加。此外，鼠疫菌又是一种典型的生物战剂和生物恐怖剂。因此，对鼠疫菌致病机制的研究对国民健康、社会经济发展和国家安全具有重要意义。鼠疫菌是由假结核耶尔森氏菌（以下简称假结核菌）O:1b血清型进化而来。典型的鼠疫菌含有3个毒力质粒（pMT1、pPCP1和pCD1），其中pCD1是从假结核菌遗传下来的固有质粒，而pMT1和pPCP1则是通过水平转移从外界获得的质粒。鼠疫菌引起严重的致死性疾病，而假结核菌只引起温和的肠道疾病，这说明新获得质粒与鼠疫菌的强致病性密切相关。那么，新获得质粒与固有质粒之间是否存在相互作用呢？若存在相互作用，其对致病性的影响又是如何呢？为了回答上述两个问题，本文基于田鼠型鼠疫菌201质粒缺失突变株，通过毒力分析、基因敲除和蛋白表达分析等策略，研究了质粒间相互作用及其与致病性的关系。鼠疫菌201株，除含有pPCP1、pMT1、pCD1外，还含有一个隐性质粒pCRY。本研究基于鼠疫菌201株及其15个不同质粒缺失株，通过生存分析评价了它们的毒力。结果表明，pCD1质粒是鼠疫菌致病必不可少的，pMT1质粒对小鼠有一定的毒力，pPCP1和pCRY单独或共存时毒力很低。脏器存活分析结果显示，所有含pCD1质粒的鼠疫菌株pCD1+pMT1+pCRY+、pPCP1+pCD1+pMT1+、pPCP1+pCD1+pCRY+、pPCP1+pCD1+、pCD1+pCRY+、pCD1+在肝、脾脏器中能分离到活菌，但pCD1+pMT1+例外，这个结果表明pMT1可能对pCD1质粒具有抑制作用，而pPCP1或pCRY却能抵消pMT1的这种抑制作用。此后，我们结合SDS-PAGE电泳和质谱分析的方法，对pCD1质粒编码的三型分泌系统外膜蛋白（Yops）的分泌情况进行了测定，发现pCD1+pMT1+与其它含pCD1质粒的菌株相比，YopN和LcrV的表达明显受到抑制，再次证明pMT1对pCD1质粒有抑制作用，而这种抑制作用会因其它质粒的存在而消失。为了研究质粒间互作与致病性的关系，我们采用基因敲除的策略构建了pPCP1+pCD1+pMT1+pla、pPCP1+pMT1+pla、pCD1+pMT1+ymt和pMT1+ymt等基因缺失突变株。通过比较这些突变株与未突变株的毒力，证明在pCD1质粒缺失的情况下，鼠毒素起主要的毒力作用，同时pla具有降解鼠毒素的作用。pPCP1+pCD1+pMT1+pla与pPCP1+pCD1+pMT1+相比，在小鼠脏器中存活能力明显降低，说明了pPCP1促进鼠疫菌在宿主体内的感染能力主要由pla负担。pCRY除可能抵消pMT1的抑制作用外，其他功能尚不清楚，但pPCP1、pMT1和pCD1却是鼠疫菌保持完整毒力所必需的。