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目的:痛经是指妇女在经期及其前后,出现小腹或腰部疼痛,甚至痛及腰骶。每随月经周期而发,严重者可伴恶心呕吐、冷汗淋漓、手足厥冷,甚至昏厥,给工作及生活带来影响。
国内医学领域快速发展的今天,中医药与现代医学并存,对于这种有规律性的疾病,哪种方法更安全,疗效更高,更无毒副作用?而且最佳的干预时机也是最为重要的,本研究以实验性大鼠为研究对象,从内外干预及预先处理入手,观察外源性西药与非外源性药物灸法之间有着怎么样的差别?观察大鼠实验前中后对照体重;子宫、卵巢湿重;扭体行为学反应;血管内环境相关因子;及免疫组化法病理改变。为临床应用提供实验依据。
方法:选用wistar健康未孕雌性大鼠32只,随机分为空白组,模型组,艾灸组,西药组,每组8只。除空白组外,其余各组大鼠均皮下注射乙烯雌酚注射液连续10天,第1,10天注射0.8mg/只,第2-9天注射0.4mg/只。末次给己烯雌酚24h后,腹腔注射催产素2u/只。空白组每日给同剂量的生理盐水。记录大鼠实验前中后体重;子宫,卵巢湿重。根据Schmauss行为学评分标准,记录30分钟内扭体反应的潜伏期、扭体评分及扭体次数,采用ELISA法检测血清SICAM-1、SVCAM-1含量。采用HE病检、免疫组化法检测子宫MMP-9.MMP-2表达。
结果:
1.大鼠前中后体重
实验前各组大鼠体重无统计学差异(P>0.05),实验5天称重,各组大鼠体重均有不同程度上升趋势,仍无统计学差异(P>0.05)。实验后称重,空白组与模型组体重比较,体重明显增加,差异有统计学意义(P<0.05),说明模型组造模过程中受到一定影响。艾灸组与模型组比较,体重增加,差异有统计学意义(P<0.05),说明艾灸的干预作用,对动物身体正常机能并无太大影响。西药组与艾灸组比较,体重有下降趋势,有显著性差异(P<0.01)。艾灸组与空白组比较,体重无明显差异(P>0.05)。西药组与空白组比较,体重有下降趋势,有显著性差异(P<0.01)。
2.大鼠扭体反应
模型组与空白组相比:扭体反应的潜伏期明显的减少,扭体次数与扭体评分明显增高,均有统计学意义(P<0.01);由此说明模型制备成功。艾灸组与西药组扭体潜伏期与模型组相比有延长,差异有统计学意义(P<0.05);扭体评分和次数各组与模型组相比均明显减少,差异有统计学意义(P<0.01)。但是艾灸组扭体评分与空白组无明显统计学意义(P>0.05)。说明在提前介入时机,艾灸组与西药组均能改善大鼠痛经扭体反应。
3.大鼠子宫、卵巢湿重和系数
各组大鼠子宫、卵巢湿重差异均无统计学意义(P>0.05)。结果说明,造模后可能会导致子宫平滑肌功能性痉挛,但不至于导致脏器重量的明显改变。各组大鼠子宫、卵巢系数比较,模型组比较空白组,差异有统计学意义(P<0.05);艾灸组比较模型组,差异无统计学意义(P>0.05);艾灸组比较空白组差异无统计学意义(P>0.05);西药组比较模型组、艾灸组有升高趋势,差异无统计学意义(P>0.05);但是比较空白组升高较为明显,差异有统计学意义(P<0.05)。该结果综合体重变化分析,是由于实验后模型组体重下降;西药组体重明显下降而导致两组子宫系数增高,说明西药组子宫系数明显升高是和体重下降有关。
4.ELISA法检测大鼠血清SICAM-1,SVCAM-1含量。
该实验结果显示,所有的样品均表达出SICAM-1、SVCAM-1。模型组中SICAM-1、SVCAM-1表达最高,与空白组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。艾灸组、西药组与模型组比较,两组中SICAM-1、SVCAM-1浓度表达均低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05)。说明艾灸组、西药组两种治疗方案均达到降低SICAM-1的目的。艾灸组,西药组比较空白组,SICAM-1、SVCAM-1浓度表达高于空白组,差异有统计学意义(P<0.05)。艾灸组与西药组比较,SICAM-1、SVCAM-1浓度表达无明显的统计学差异(P>0.05)。
5.HE病检、免疫组化法检测大鼠子宫内MMP-9.MMP-2表达。
子宫HE结果显示,模型中比较空白组,子宫病理损伤评分明显升高,差异有统计学意义(P<0.01),艾灸组、西药组比较模型组,子宫病理损伤评分降低,差异有统计学意义(P<0.01)。艾灸组与西药组相比,子宫病理损伤评分差异无统计学意义(P>0.05)。
子宫内膜MMP-2、MMP-9表达显示,模型组比较空白组,子宫内膜MMP-2、MMP-9表达明显升高,差异有统计学意义(P<0.01),艾灸组、西药组比较模型组,子宫内膜MMP-2、MMP-9表达降低,有统计学差异(P<0.01)。艾灸组与西药组无统计学差异(P>0.05)。
结论:
1.观察艾灸组在实验前后体重平稳增加,说明艾灸对机体的正常生理功能没有影响。各组实验大鼠子宫、卵巢湿重没有差异,说明痛经模型还不足以造成器质性病变。从行为学观察扭体潜伏期,扭体评分和扭体次数,艾灸可有效缓解痛经症状。虽然西药和艾灸的疗效指标并无差异,但是西药实验后体重下降,子宫、卵巢系数升高,可能西药对于机体的还存在一定影响,仍需进一步研究证实。
2.艾灸可以抑制血清SICAM-1、SVCAM-1的阳性表达,改善血管内环境。
3.艾灸可以抑制子宫内膜MMP-2.MMP-9的阳性表达,减少子宫内膜的损伤。