【目的】脆性X综合征（FXS）是常见的遗传性智力低下疾病之一，其发病的主要原因是由于FMR1基因5′端非编码区（C GG） n三核苷酸重复序列不稳定扩增及其相邻部位CpG岛异常甲基化使FMR1基因转录失活，导致其编码的产物——脆性X智力低下相关蛋白F M RP表达减少或缺失而引起。该病的临床表现包括发育迟滞，不同程度的智力低下、注意力缺陷、多动症及孤独症样表现等。FMRP在脑组织中表达丰富，它作为一种选择性RNA结合蛋白，能与大量mRN A结合，从转录后水平调控一系列mRN A的翻译过程。过去已证实 FMRP是一种多功能蛋白，从多种途径参与基因的表达调控。本研究通过免疫共沉淀联合质谱分析发现，FMRP与选择性剪接调控因子RBM14有直接相互作用。因此，推测FMRP通过与RBM14相互作用选择性参与调节部分基因的选择性剪接过程。本研究通过选定多个突触可塑性相关基因作为靶基因，采用荧光定量PCR的方法检测FVB小鼠海马组织及小鼠Neuro-2a细胞中各个靶基因剪接异构体的表达量。通过比较各个剪接异构体表达含量的比值，以明确FMRP对各个靶基因中相关盒式外显子的选择性剪接调控作用。以期探索FM RP参与的选择性剪接调控机制及其在 FXS病理生理过程中的可能作用，为进一步阐明FXS发病机制提供新的理论依据。　　【方法】　　1、利用FVB小鼠海马组织进行蛋白免疫共沉淀实验，联合质谱分析，检测小鼠体内FMRP相互作用蛋白的情况；　　2、提取不同发育时期FVB小鼠海马组织总蛋白、总RNA，采用Western blot检测Fmr1 WT鼠及KO鼠海马组织中RBM14的表达情况，采用qRT-PCR检测Fmr1 WT鼠及KO鼠海马组织中各个靶基因剪接异构体的表达量；　　3、利用FMRP干扰、过表达质粒及RBM14干扰表达质粒（以及相应对照质粒）转染Neuro-2a细胞，转染48小时之后提取细胞总RNA，采用qRT-PCR检测Neuro-2a细胞中各个靶基因剪接异构体的表达量；　　4、构建Protrudin-L（包含ExL）、Protrudin-S（Ex L缺失）、Tau-L（包含Ex10）、Tau-S（Ex10缺失）绿色荧光表达质粒（以及相应对照质粒），转染Neuro-2a细胞后，经反式-维甲酸诱导分化后，在荧光显微镜下观察细胞突起生长的情况。　　【结果】　　1、采用FVB小鼠海马组织进行CO-IP实验，联合质谱分析发现，FMRP可结合RBM14，并通过Western blot得到验证；　　2、在三个发育时期（E18、P7、P60），Fmr1 WT鼠与KO鼠海马组织中RBM14的表达无明显差异；在 E18、P60时期， Fmr1 KO鼠海马组织中Protrudin-S/Protrudin-L比值上升，Tau-S/Tau-L比值下降，差异均具有统计学意义，在P7时期则均无明显差异；NCAM-S/NCAM-L比值在三个时期均无统计学差异；　　3、Neuro-2a细胞干扰表达FMRP或 RBM14后，Protrudin-S/Protrudin-L比值上升，Tau-S/Tau-L比值下降，差异均具有统计学意义；NCAM-S/NCAM-L比值变化均无统计学差异；　　4、Neuro-2a细胞过表达 FMRP后，Protrudin-S/Protrudin-L比值下降， Tau-S/Tau-L比值上升，差异均具有统计学意义；NCAM-S/NCAM-L比值变化无统计学差异；Neuro-2a细胞过表达 FMRP，同时干扰表达 RBM14后， Protrudin-S/Protrudin-L、Tau-S/Tau-L和NCAM-S/NCAM-L比值变化均无统计学差异；　　5、Protrudin-L、Protrudin-S、Tau-L、Tau-S绿色荧光表达质粒转染Neuro-2a细胞经诱导分化后，Protrudin-L和Tau-S转染组细胞突起显著延长，差异均具有统计学意义。　　【结论】本研究首次证实 FMRP通过与选择性剪接相关蛋白 RBM14结合，参与pre-mRNA选择性剪接过程，而且FMRP表达改变所导致的部分基因选择性剪接异常可影响细胞突起生长。据此，本研究结果揭示 FMRP的一种新功能：即通过参与选择性剪接调控过程来调节相关基因表达，该功能很可能与脑发育及FXS发病过程密切相关。