三七总皂苷对兔激素性股骨头缺血性坏死VEGFmRNA和BMP2mRNA的影响

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目的:通过观察三七总皂苷对激素性兔股骨头坏死骨组织中血管内皮生长因子(Vascular Endothelial Growth Factor,VEGF)和骨形态形成蛋白-2(Bone Morphogenetic Protein-2,BMP-2)的表达的变化情况以及病理改变,探讨三七总皂苷防治激素性股骨头缺血性坏死的效果和作用机制,为传统中医药三七防治激素性股骨头缺血性坏死提供实验依据。方法:将135只雄性新西兰兔运用改进马血清联合甲强龙造模方法建立兔激素性股骨头坏死模型,造模完成后运用病理切片等相关检测指标进行鉴定模型。模型鉴定成功后采用随机数字表法进行随机分三组,即生理盐水组、复方骨肽组及三七总皂苷组。分别给予生理盐水、复方骨肽及三七总皂苷在股骨头局部穿刺给药治疗,给药剂量为0.1ml/kg/w,每周一次,连续治疗四周。治疗四周后,空气栓塞法处死,分别取一侧股骨头经进行股骨头HE染色组织形态学观察及空骨陷窝率等检测,并超低温冷冻另一侧行实时荧光定量PCR检测股骨头中VEGFm RNA及BMP-2m RNA的表达,实验结果采用SPSS.22统计软件进行数据分析。结果:1.造模后大白兔精神状态稍萎靡,兔毛稍暗淡、蓬松,活动较造模前减少,下肢变得笨拙。食欲稍减退,大小便正常,体重稍减轻。股骨头HE染色观察可见骨小梁稀疏、断裂,骨细胞散乱分布不规则,骨髓腔骨细胞减少,脂肪细胞增生明显,空骨陷窝增多,证实造模成功。2.治疗后各组大体形态及股骨头观察:(1)生理盐水组:精神较萎靡,毛色暗淡蓬乱、脱毛,活动明显减少,食欲减退,体重减轻明显。股骨头未见明显塌陷,失去光泽变暗淡,整体呈青灰色,股骨头表面软骨变薄,股骨颈较骨质疏松,易于凿切。(2)复方骨肽组:精神状态尚可,毛色蓬松但有光泽,无明显脱毛,偶有弹跳活动,食欲较正常,体重无明显改变。兔股骨头形态完整,表面有光泽稍暗淡,整体呈淡白色,股骨颈骨质较坚硬,较难凿切。(3)三七总皂苷组:精神状态良好,毛色有光泽稍蓬松,弹跳活动尚可,食欲正常,体重稍增加。股骨头形态完整,表面有光泽,整体呈淡白色,股骨颈骨质较坚硬,较难凿切。3.各组股骨头HE染色观察:(1)生理盐水组:骨组织连续性中段,骨小梁出现断裂,破坏,骨小梁出现纤维化,死骨形成,骨小梁间骨髓造血细胞减少,骨细胞散乱分布不规则,脂肪细胞增多明显,空骨细胞窝明显增多,空骨陷窝率为20.0%;(2)复方骨肽组:骨组织连续性尚可,骨小梁稍变细,部分出现骨小梁纤维化,可见新骨生成,骨细胞分布规则,股骨头髓腔内可见造血细胞,脂肪细胞无明显增多,空骨陷窝率为15.93%;(3)三七总皂苷组:骨组织连续性尚可,骨小梁稍变细,破坏不明显,可见新骨生成,骨细胞分布规则,股骨头髓腔内可见造血细胞,空骨细胞窝无明显增多,空骨陷窝率为15.10%。各组空骨陷窝率结果经方差分析,复方骨肽组和三七总皂苷组分别与生理盐水组比较差异明显,均具有统计学意义(P<0.05),复方骨肽组与三七总皂苷组比较无明显差异,没有统计学意义(P>0.05)。4.实时荧光定量PCR检测每组股骨头中VEGFm RNA及BMP-2m RNA的表达结果:复方骨肽组和三七总皂苷组分别与生理盐水组比较,BMP2m RNA的表达均具有统计学意义(p<0.05),三七总皂苷组与复方骨肽组中BMP2m RNA的表达比较无统计学意义(p>0.05);复方骨肽组和三七总皂苷组分别与生理盐水组比较,VEGFm RNA的表达均具有统计学意义(p<0.05),且三七总皂苷组优于骨肽组(p<0.05)。结论:1、激素可导致兔股骨头组织中VEGFm RNA及BMP2m RNA的表达明显降低,进而影响股骨头组织的自身修复。2、三七总皂苷可提高兔激素性股骨头缺血性坏死骨组织中VEGFm RNA和BMP2m RNA的表达,从而促进骨组织血管新生及骨的修复。3、三七总皂苷对兔激素性股骨头坏死具有一定的防治作用。
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