【摘 要】
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实验目的:本实验研究目的是从细胞和动物两方面探讨脐带间充质干细胞来源的分泌素（Human Umbilical Cord Mesenchymal Stem Cells Secretomes,h UCS）对牙龈组织修复和再生的影响,为脐带间充质干细胞来源的分泌素应用在口腔领域中对牙龈退缩的临床治疗提供理论支持。实验方法:组织块法提取SD大鼠的原代牙龈成纤维细胞（Gingival Fibroblasts
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实验目的:本实验研究目的是从细胞和动物两方面探讨脐带间充质干细胞来源的分泌素（Human Umbilical Cord Mesenchymal Stem Cells Secretomes,h UCS）对牙龈组织修复和再生的影响,为脐带间充质干细胞来源的分泌素应用在口腔领域中对牙龈退缩的临床治疗提供理论支持。实验方法:组织块法提取SD大鼠的原代牙龈成纤维细胞（Gingival Fibroblasts,GFs）并进行传代扩增、冻存与复苏,通过免疫组织化学染色鉴定其来源。运用CCK-8法、细胞划痕法,检测不同浓度的h UCS对GFs的生物学作用,并选择适宜浓度进行后续实验。采用钢丝结扎法建立牙龈退缩的动物模型,将适宜浓度的h UCS局部注射在退缩部位的牙龈,分析组织学染色,q RT-PCR检测纤维相关因子Col-1、Col-3、血管生长因子VEGF表达的结果。实验结果:1、原代大鼠的牙龈成纤维细胞,为长梭形、纺锤形。冻存并复苏牙龈成纤维细胞,两代后其生物学特性与原代细胞相似。免疫组化染色的结果是抗波形蛋白阳性,抗角蛋白阴性,证明是中胚层起源的成纤维细胞。2、细胞实验结果显示h UCS能够促进GFs的增殖和迁移（P＜0.05）,当h UCS的浓度为10μg/m L时作用效果更佳。3、动物实验中,HE染色显示生理盐水组牙龈上皮钉突明显缩短变平,结合上皮向根尖方向迁移,给药组牙龈上皮钉突清晰,结合上皮附着在釉牙骨质界,h UCS组Col-1、Col-3、VEGF表达较对照组均有所提高（P＜0.05）。结论:本实验从细胞层面和动物层面验证了脐带间充质干细胞来源的的分泌素促进牙龈组织的修复和再生的效果显著,hUCS能促进牙龈中纤维相关因子Col-1、Col-3、血管生长因子VEGF表达,因此h UCS具有优异的促进牙龈修复和再生的能力,以及良好的口腔临床治疗潜力。
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