牛大力抗疲劳药效筛选及其作用机理研究

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目的:疲劳是一种主观不适感觉。疲劳得不到及时消除会出现慢性疲劳综合征(CFS),严重危害人类健康。目前临床上用于治疗和缓解疲劳状态的化学药物有限,从天然产物或者中草药中提取的活性有效部位由于其副作用少、无成瘾性,并且不含有容易对人体造成危害的兴奋性成分而成为近年来抗疲劳食品药品的研究和开发热点。牛大力Millettia Speciosa Champ. Leguminosae)为豆科崖豆藤属植物美丽崖豆藤的干燥根,具有补虚润肺、强筋活络之功,用于病后虚弱、腰肌劳损等症状,是增力处方中使用频率较高的中药。本研究初步证实牛大力水提取物的抗疲劳活性,筛选牛大力水提取物中具有抗疲劳功效的部位,并对其有效部位抗疲劳的机制进行初步研究,为牛大力抗疲劳保健功能食品的开发提供研究基础。方法:1.牛大力水提取物抗疲劳作用研究以牛大力水提取物为研究目标,通过力竭游泳和爬杆两个宏观实验探讨牛大力水提取物的抗疲劳作用,并从能量代谢系统探讨牛大力水提取物抗疲劳的作用机制。2.牛大力水提取物抗疲劳和体外抗氧化活性有效部位筛选研究通过对牛大力水提取物进行乙醇沉淀处理后得到牛大力上清液以及沉淀部位,并对沉淀进行除蛋白操作后得到牛大力粗多糖部位。通过力竭游泳实验筛选其抗疲劳活性有效部位,并结合结晶紫以及DPPH·体外抗氧化实验对两部位的抗氧化活性进行筛选研究。3.牛大力粗多糖部位抗疲劳机制初步研究通过测定游泳后小鼠血液和肌肉生化指标,探索牛大力粗多糖部位抗疲劳功效与抗氧化、减少自由基的产生作用之间的关联性,更好的阐明牛大力粗多糖部位抗疲劳作用机理。结果:1.牛大力水提取物抗疲劳作用研究①牛大力水提取物对力竭游泳以及爬杆时间的影响结果显示,与空白组相比,牛大力水提取物对小鼠力竭游泳以及爬杆时间均有延长作用,提示牛大力水提取物具有抗疲劳效果。②牛大力水提取物对游泳后小鼠生化指标的影响通过测定牛大力水提取物对游泳后小鼠甘油三酯(TG)、尿素氮(BUN)、肌糖原、以及乳酸脱氢酶(LDH)和磷酸肌酸激酶(CK)的影响来探讨牛大力水提取物的抗疲劳作用。结果显示,与空白组相比,牛大力水提取物能显著性降低血浆中TG和BUN含量,提高肌糖原含量。与空白组比较,牛大力水提取物组对LDH活力虽无降低作用(无统计学意义),但是能显著性降低血浆CK的水平。2.牛大力水提取物抗疲劳和抗氧化活性有效部位筛选研究通过小鼠负重游泳发现与正常组相比,牛大力粗多糖组可显著性延长小鼠的力竭游泳时间,而牛大力上清液组均无明显延长作用。说明牛大力中抗疲劳活性有效成分主要集中于牛大力粗多糖部位。通过结晶紫以及DPPH·实验发现牛大力粗多糖部位能有效清除自由基,而上清部位各浓度的清除率均比同等浓度条件下的牛大力粗多糖部位低,表明牛大力粗多糖部位比上清液部位具有更强的体外抗氧化作用。该实验结果提示抗氧化作用从而减少游泳过程中产生的自由基可能是牛大力粗多糖部位发挥抗疲劳作用的重要作用机制之一。3.牛大力粗多糖部位抗疲劳机制初步研究①对能量供应的影响:牛大力粗多糖能显著升高体内血糖和肌糖原的含量,降低尿素氮含量。②对代谢产物的影响:与模型组相比,牛大力粗多糖各剂量组均可以减少体内乳酸的产生,减少其在肌肉组织的蓄积,从而达到抗疲劳的目的。③对氧化应激作用的影响:体内试验显示,牛大力粗多糖部位能显著降低疲劳动物运动后血清LDH及CK水平,增加血中SOD和GSH活力,减少MDA的产生。结论:本论文证实牛大力粗多糖部位是其抗疲劳活性的有效部位,主要是对能量代谢和抗氧化功能进行调节:增加能量储备以及血糖的供能,减少代谢产物对机体的损伤,并且可以清除体内产生的自由基,使机体免受运动过程中产生的自由基引起的损伤,从而起到延缓疲劳产生的作用。
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