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白念珠菌(Candida albicans)是一种人类常见的机会致病真菌,常导致免疫系统受损的人群粘膜表面或系统感染。白念珠菌至少有七种不同形态,不同形态的菌落之间可以高频率的相互转换,不同形态之间转换能力与白念珠菌致病能力密切相关。其中研究较多的是酵母形态-菌丝形态和白菌-灰菌形态转换。特定条件下酿酒酵母能进行侵入生长和丝状生长,其调控机制已研究的比较清楚。为了研究白念珠菌形态转换的调控是否也存在类似的机制,我们利用酿酒酵母单倍体flo8缺失株,通过功能互补的方法筛选白念珠菌基因组文库,以获得白念珠菌形态发生相关的基因。我们筛选得到EAP2和CZF2等多个基因,EAP2和CZF2都能校正flo8缺失株侵入生长缺陷。EAP2基因编码一个785个氨基酸的蛋白。氨基酸序列分析表明,Eap2的N端含有一个真菌特异性的Tos9结构域,其主要特征是包括一个非常保守的序列模式(64KRWTDG69),是一个可能的PKA磷酸化位点。Eap2蛋白N-端有一个核定位信号序列,GFP-Eap2融合表达发现,Eap2定位于细胞核内。CZF2编码一个624个氨基酸的蛋白,属于Gal4蛋白家族,其N-端含有一保守的C6型锌指结构Zn2Cys6 DNA结合结构域。保守的MAPK途径和cAMP/PKA信号转导途径均参与了酿酒酵母和白念珠菌形态发生的调控,利用酿酒酵母缺失株,我们分析了Eap2和Czf2的功能。在酿酒酵母双倍体缺失株中,Eap2和Czf2都能校正ste12,ste7,tec1和flo8在氮源缺乏条件下菌丝生长的缺陷。在酿酒酵母单倍体缺失株中,Eap2和Czf2能校正ste12,ste7,tec1和flo8在碳源缺乏条件下侵入生长的缺陷。说明Eap2和Czf2在酿酒酵母菌丝生长和侵入生长中的激活作用绕过了MAPK途径和Flo8因子的需求。Northern杂交分析表明,EAP2基因有两个大小不同的转录本,分别为~